刘修志，孟昊业，赵金娟，王 鹏，林万程，王 恺，管延军，张 健，许文静，彭 江

1 解放军医学院，北京 100853；2 解放军总医院 全军骨科战创伤重点实验室，骨科再生医学北京市重点实验室，北京 100853

股骨头骨坏死(osteonecrosis of the femoral head，ONFH)是由多种原因导致股骨头结构破坏和塌陷而造成关节疼痛和功能障碍的临床难治性疾病[1-3]。通过调节骨代谢以减少破骨、增加成骨是治疗早期ONFH的一个方向。地舒单抗是一种全人源化的RANKL抑制剂，通过抑制RANKL可抑制破骨细胞的功能，减少骨吸收，增加骨密度[4-5]。地舒单抗在临床上还用于骨巨细胞瘤等肿瘤的治疗，但对ONFH的作用尚未见报道。干细胞具有自我更新和形成分化细胞的能力，是再生治疗过程中重要的种子细胞。1993年Hernigou等首次利用自体间充质干细胞联合标准髓心减压(core decompression，CD)治疗ONFH[6]。近年来干细胞疗法成为治疗ONFH的热点。目前用于ONFH治疗的干细胞包括骨髓间充质干细胞、脂肪干细胞、外周血干细胞等[7-9]。与其他来源的间充质干细胞相比，人脐带来源间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs)具有获取方便、获取率高、多次传代后均一性好等优点[8,10-11]。因此，本研究培养hUC-MSCs，通过体外实验研究地舒单抗对hUC-MSCs的增殖和成骨分化的影响，进一步探索两者的联合应用在ONFH模型中的作用，以期为临床治疗ONFH提供新思路。

材料与方法

1 主要材料与试剂 地舒单抗注射液(Prolia，60 mg/mL)，原代hUC-MSCs(中盛溯源股份有限公司，中国)，DMEM/F12培养基(Gibco，美国)，PBS缓冲液(Hyclone，美国)，胰酶、油红O染液(Sigma，美国)，胎牛血清(四季青，中国)，成骨分化诱导液、成脂分化诱导液、成软骨……