路 明，杨 博，刘 扬，王 慧，洪 文，黄克林，刘 青

（新疆医科大学第一附属医院肛肠科,乌鲁木齐 830054）

我国人群中肛门失禁的发病率约为7.1%，老年人群所占的比例约为8.5%[1-3]。肛门失禁由先天、神经损伤、创伤（包括外伤、产后创伤、肛周手术造成的医源性损伤）等原因造成的[4-5]。不同原因导致的肛门失禁类型的表现不同，对应的治疗方式、效果也不同。临床中发病率最高的是肛门括约肌损伤和腰骶神经损伤造成的肛门失禁。由于肛门失禁病情严重，对患者的生活质量产生较大影响，故改善肛门失禁问题，对提升患者生活质量极为重要。猪因其解剖学、神经生物学、心脏血管系统、胃肠道及基因组相似度等方面更接近于人类，可作为理想的疾病动物模型[6-9]。本研究通过改良肛门括约肌折叠术对小型猪肛门失禁模型进行治疗，观察术后小型猪肛门失禁的改善情况，进一步验证改良肛门括约肌折叠术的效果和应用前景。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组健康巴马小型猪（新疆天康畜牧科技有限公司，编号：20201016），月龄（4.2±0.2）月，体重（19.58±1.73）kg，雌性14 只，雄性6 只，共20 只，普通级饲养。按随机数字表法分为骶神经损伤组、括约肌离断组，每组各10 只。骶神经损伤组采用骶骨神经区注射高浓度罗哌卡因的方式构建小型猪肛门失禁模型[10-11]。当小型猪出现无法自行控制排便，排便频次超过10次时造模成功。括约肌离断组采用肛门括约肌离断法构建小型猪肛门失禁模型。两组术后正常饲养2 周后行改良肛门括约肌折叠术。术后4 周取括约肌组织行病理学检查。实验过程中对动物的处置符合中华人民共和国科学技术部2006年颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》标准[12]。

1.2 小型猪肛门失禁模型的手术方法将两组小型猪麻醉前10 min 肌肉注射20 mg/kg硫酸阿托品；5 mg/kg舒泰50 与0.08 mL/kg 速眠新按1∶1 混合后进行肌肉注射麻醉。（1）括约肌离断组：麻醉起效后行右侧卧位，肛周备皮，清洁消毒铺巾，括约肌组织断裂处局部注射利多卡因与0.9%生理盐水1∶1 稀释液，切开已愈合皮肤，用小弯钳钝性分离皮下组织，寻找括约肌的断端，2-0 爱惜康缝合线行括约肌连续折叠缝合行括约肌加固紧缩。缝合时保持肛门松紧适当，不能因张力过大形成肛门狭窄。手术结束后，丝线缝合肛周皮肤组织，切除肛周松弛多余的皮肤，保持创面整齐，利于创面愈合。（2）骶神经损伤组：麻醉起效后行右侧卧位，肛周备皮，清洁消毒铺巾，给予肛周3点、9 点位置距肛缘1 cm 处局部注射利多卡因与0.9%生理盐水1∶1 稀释液，同一位置做长约2 cm 放射状切口，用小弯钳钝性分离皮下组织，组织剪锐性分离肛门括约肌，2-0 爱惜康缝合线对括约肌连续折叠缝合行括约肌加固紧缩，缝合时保持肛门松紧适当，不能因张力过大形成肛门狭窄。

1.3 主要观察指标及检测方法

1.3.1 两组小型猪排便频次、大便控制情况检测观察测定两组小型猪术后第1、2、3、7 天、术后2 周的排便频次、大便控制情况。

1.3.2 直肠肛管静息压[13]变化情况测定手术前后两组小型猪肛管静息压，操作如下：固定各组动物，完成MMS 胃肠动力检查仪[荷兰，MMS 胃肠动力学检查系统（肛肠动力），型号Solar Gl]初始化，测压管注水、调零，经肛门插入测压管3 cm，按“取值键”读取数值，采用定点牵拉法，分别记录每1 cm 处的数据，共记3次，取平均值。

1.3.3 术后括约肌组织形态学观察术后4 周取两组小型猪肛门括约肌组织，用10%甲醛溶液固定，酒精脱水，二甲苯透明石蜡包埋、切片，脱蜡水化，HE试剂盒染色，流水冲洗，烘片0.5 h，采用光学显微镜观察HE染色结果。

1.3.4 手术前后血液指标的测定手术前后第1、2、3、7天及2周抽取两组小型猪静脉血，对白细胞计数、红细胞计数、血小板计数、C-反应蛋白水平等进行检测。

1.4 统计学方法采用SPSS20.0 统计软件行分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组小型猪排便频次、大便控制情况比较两组术后麻醉清醒后均给予正常饲养，括约肌离断组术后第1天排便频次及自控大便情况无变化，术后第2、3、7 天、2 周较术前明显好转，术后排便次数明显减少，能够自行控制排便，差异具有统计学意义（P<0.05）。骶神经损伤组术后第1、2、3、7 天、2 周均较术前排便频次及自控大便情况无明显改变。术后排便频次无明显变化，不能自行控制排便，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

表1 两组小型猪排便情况（±s，次）

表1 两组小型猪排便情况（±s，次）

注：与术前比较，*P<0.05。

时间术前术后第1天术后第2天术后第3天术后第7天术后第2周骶神经损伤组5.50+1.07 5.10±0.91 4.80±1.03 4.50±0.72 4.40±1.06 4.30±1.03括约肌离断组5.30±1.05 4.80±0.95 4.05±1.02*3.10±0.89*2.70±0.85*2.40±0.83*

2.2 两组小型猪肛管静息压结果比较骶神经损伤组术后肛管静息压（16.83±3.18）mmHg 与术前（11.26±3.43）mmHg 比较显著增高，差异有统计学意义(t=14.36，P<0.05)；括约肌离断组术后肛管静息压（26.25±4.01）mmHg 与术前（15.35±2.38）mmHg 比较显著增高，差异具有统计学意义（t=20.47，P<0.05）。

2.3 两组小型猪括约肌组织形态学结果比较括约肌损伤组肛门括约肌组织形态结构与正常肛门括约肌组织形态结构相似，肌纤维连续完整，括约肌厚度、固有层厚度、肌纤维数量均接近正常；骶神经损伤组肛门括约肌组织形态与正常的括约肌结构差异较大，括约肌全层变薄，固有层结缔组织变厚，肌纤维数量明显减少、变细、断裂，横纹肌致密程度明显下降（图1）。

图1 两组小型猪括约肌组织HE染色图结果（×200）

2.4 两组小型猪血液指标结果比较术后第1～3 天，两组小型猪白细胞计数、C-反应蛋白水平均显著升高，与术前比较差异有统计学意义（P<0.05）；术后第7天～2周两组白细胞计数、血小板计数及红细胞计数与术前相比，差异无统计学意义(P>0.05)。括约肌离断组C-反应蛋白水平与术前比较，差异无统计学意义（P>0.05）；骶神经损伤组C-反应蛋白水平与术前比较显著升高，差异有统计学意义（P<0.05）（表2）。

表2 两组小型猪术前术后血液指标检测结果

3 讨论

肛门失禁是持续性或反复发作的不能感知肠内容物性状或不能控制肠内容物的排出，包括液态、气态、固态的肠内容物[4-6]。肛门失禁的外科手术治疗方案主要有肛门括约肌缺损的直接修复术和肛门括约肌增强术[14]。肛门括约肌缺损的直接修复主要通过原位填补、重叠、折叠紧缩缝合等3 种方式进行[15-17]。目前的研究中，通过保守治疗、生物反馈治疗，以及创伤性较大的外科手术治疗等方法治疗肛门失禁，均能在不同程度上改善肛门失禁的状态，但整体治疗效果不佳。本研究通过建立小型猪肛门失禁模型，模拟肛门失禁患者，采用微创手术方法进行治疗，观察其治疗效果，为临床治疗肛门失禁提供实验数据。

本研究结果显示，通过改良肛门括约肌折叠术对括约肌离断组小型猪的手术效果较为明显，术后肛门失禁症状改善明显，直肠肛管静息压较术前明显升高，说明通过手术均能够改善直肠肛管顺应性，对直肠肛管的容量敏感性有一定的改善作用。组织形态学结果显示，括约肌离断组术后括约肌形态上更接近正常括约肌，从肌纤维连续完整，括约肌厚度、固有层厚度、肌纤维数量均接近正常形态，说明通过改良括约肌折叠缝合加固能够促进括约肌的组织形态结构的恢复。改良肛门括约肌折叠术对骶神经损伤组失禁小型猪手术效果效果不佳，术后肛门失禁改善不明显，直肠肛门静息压较术前轻度升高，说明手术能改善直肠肛管顺应性，对直肠容量敏感有一定的改善作用，组织形态学上与正常括约肌组织形态差异较大，说明无法有效促进括约肌组织的恢复。两组血液指标结果显示，术后两组在第1～3天均有白细胞计数和C-反应蛋白水平的明显升高，说明两组小型猪在手术后均出现一定的炎症反应，对术后恢复有影响，但在术后第7天后括约肌离断组炎症反应消退，炎症指标水平与术前无明显差异，说明肛门失禁状态改善后炎症指标随之下降，说明括约肌离断组肛门失禁改善较好。骶神经损伤组术后第7天后C-反应蛋白与术前比较仍有明显的升高，说明仍存在炎症，也反映出肛门失禁状态改善不佳，失禁状态对肛周创面恢复有影响，导致C-反应蛋白水平数值较高。术后红细胞计数和血小板计数与术前比较无统计学意义，说明括约肌折叠缝合加固术手术创面较小，术中出血及损伤组织均较轻。

综上所述，改良肛门括约肌折叠术对括约肌离断小型猪的治疗效果显著，对于骶神经损伤小型猪的治疗效果欠佳，无法有效改善其肛门失禁状态。由于该术式对骶神经损伤导致的肛门失禁效果不明显，仅能改善直肠肛管顺应性，需采取其他方法辅助治疗。而外伤型肛门失禁可通过改良肛门括约肌折叠术进行治疗，该术式对肛周其他组织损伤小，能够较好地改善肛门失禁状态，为临床治疗肛门失禁提供了一定的实验依据。