翟璐璐，靳秀红，张向峰，李晓燕，骆彩英

［1.郑州大学附属儿童医院（河南省儿童医院、郑州儿童医院）呼吸科，河南 郑州 450048；2.柘城中医院 肝胆脾胃科，河南 柘城476200］

中性粒细胞型哮喘多见于重症哮喘及难治性哮喘中，且无明显的嗜酸性粒细胞浸润［1］。目前，该病的发病机制尚未完全明确，可能与感染、吸烟及长期使用糖皮质激素有关，常表现为气促、胸闷及咳嗽等，多发于儿童群体［2］。因中性粒细胞型哮喘患儿肺功能下降更为严重，急性发作次数较多，且标准治疗的疗效欠佳［3］，故对患儿的病情发展进行评估十分重要，可为临床治疗提供参考依据。血清颗粒蛋白前体（PGRN）是一种多功能蛋白，可调节正常组织的发育、增殖和防御功能［4］。既往研究［5］显示，PGRN 参与多种自身免疫疾病及炎症性疾病的发生发展，但是否可作为新型的反映中性粒细胞型哮喘患儿病情严重程度的指标尚不清楚。因此，本研究将探讨分析PGRN 与中性粒细胞型哮喘患儿病情的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年5 月至2021 年5 月在郑州大学附属儿童医院确诊的中性粒细胞型哮喘患儿94 例，根据患儿病情的严重程度［6］分为轻度组37 例、中度组32 例及重度组25 例。轻度组男21 例，女16例，年龄7～13 岁，平均（10.16±1.32）岁；中度组男24 例，女8 例，年龄7～13 岁，平均（10.28±1.18）岁；重度组男12 例，女13 例，年龄7～13 岁，平均（10.09±1.41）岁。三组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

纳入标准：①符合中性粒细胞型哮喘诊断标准［7］；②经郑州大学附属儿童医院伦理委员会通过，患儿监护人了解并知情同意。排除标准：①存在其他类型哮喘；②存在恶性肿瘤；③存在肝肾功能不全；④存在精神疾病者。

1.2 方法

1.2.1 肺功能 所有患儿均于入组当日采用德国康讯肺功能机行肺功能检测，记录第1 秒用力呼气容积（FEV1）、用力肺活量（FVC），并计算FEV1/FVC。

1.2.2 PGRN、肿瘤坏死因子（TNF-α）及白细胞介素-8（IL-8）于入组当日采集所有患儿空腹静脉血液3 mL 置于无抗凝剂的一次性真空采血管中备用，将标本放置在-40℃的条件下保存，待血液完全凝固后进行离心分离血清（8 cm 离心半径，3 000 r/min 离心10 min）。取上层清液采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测PGRN、TNF-α 及IL-8水平。仪器：小型VIPAS 全自动荧光酶标仪，试剂和试剂盒均由武汉菲恩生物科技有限公司提供。检验过程严格按仪器与试剂说明书进行。

1.3 统计学方法

本研究数据采用SPSS 22.0 统计学软件进行分析，满足正态分布且方差齐的计量资料用均数±标准差（）表示，采用单因素方差分析比较组间差异；计数资料用百分率（%）表示，采用χ2检验。采用Pearson 相关性分析PGRN 水平与FEV1、FVC 及FEV1/FVC 的关系，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组肺功能水平比较

中度组及重度组FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平低于轻度组，差异有统计学意义（P＜0.05）；相较于中度组，重度组FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平更低，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 三组肺功能水平比较（）

表1 三组肺功能水平比较（）

注：1）与轻度组比较，P＜0.05；2）与中度组比较，P＜0.05。

2.2 三组PGRN、TNF-α 及IL-8 比较

中度组及重度组PGRN、TNF-α 及IL-8 水平均高于轻度组，差异有统计学意义（P＜0.05）；相较于中度组，重度组PGRN、TNF-α 及IL-8 水平更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 三组PGRN、TNF-α 及IL-8 比较（）

表2 三组PGRN、TNF-α 及IL-8 比较（）

注：1）与轻度组比较，P＜0.05；2）与中度组比较，P＜0.05。

2.3 PGRN 水平与FEV1、FVC 及FEV1/FVC 的关系

PGRN 水 平 与FEV1（r=-0.241,P=0.015）、FVC（r=-0.252,P=0.012）及FEV1/FVC（r=-0.225,P=0.025）均呈负相关。

3 讨论

支气管哮喘是以气道出现慢性炎症反应为主要特征的慢性气道疾病，具有病死率高及发病率高等特点。根据诱导痰细胞比例可分为嗜酸粒细胞型、中性粒细胞型、混合粒细胞型及寡粒细胞型4 类，其中中性粒细胞型所占比例最高，是哮喘中最重要的表型，也是导致患者病情控制不佳，激素治疗反应差的重要原因之一［8-9］。因此，早期对中性粒细胞型哮喘的病情进行评估并制定有效的干预措施，对控制病情的发展和预后具有积极作用。本研究结果显示，中度组及重度组的FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平低于轻度组，且相较于中度组，重度组的FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平更低，FEV1、FVC 和FEV1/FVC 是反应患者肺功能水平的重要指标，提示中性粒细胞型哮喘儿病情越严重，肺功能水平越差。

本研究结果显示，中度组及重度组的PGRN、TNF-α 及IL-8 水平均高于轻度组，提示随着中性粒细胞型哮喘儿病情的加重，PGRN、TNF-α 及IL-8 水平存在异常升高。PGRN 是一种分泌型糖蛋白，在多种组织中广泛表达，在介导胚胎发育、组织损伤中有重要作用，与慢性炎症性疾病如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等疾病的严重程度密切相关［10-11］。有研究［12］发现，PGRN 在成年人脓毒症感染中有较高的表达水平，其水解产物颗粒蛋白（GRN）可作为Toll 样受体9 的信号通路辅助因子参与疾病进展，这与本研究部分结果相一致。且周利航等［13］研究结果发现，PGRN 可参与炎症反应，而炎症反应是中性粒细胞型哮喘发生发展的重要因素［14］，由此推测，PGRN 参与中性粒细胞型哮喘的进程中。PGRN 通过刺激单核巨噬细胞分泌TNF-α，促使炎症反应加重，进而使IL-8 水平升高，此外，PGRN 促使大量的巨噬细胞聚集在脂肪组织中，并将募集到的巨噬细胞转化为促炎症细胞，导致大量的促炎症因子生成［15］，使患儿病情加重，肺功能下降。Pearson 相关性显示，PGRN 水平与FEV1、FVC 及FEV1/FVC 均呈负相关，提示PGRN 可反映中性粒细胞型哮喘病情的严重程度，当PGRN 水平越高时，患儿肺功能越差，病情越严重。

综上所述，PGRN 在中性粒细胞型哮喘患儿中存在明显高表达，且与病情严重程度密切相关，随着患儿病情的加重，其表达水平随之增加。