王涛，王艺清，漆思雨，周喆，陈志丹，孙威江*

茶树CLH基因家族的鉴定与转录调控研究及其在白化茶树中的表达分析

王涛1,3,4,5，王艺清1,3,4,5，漆思雨1,3,4,5，周喆1,3,4,5，陈志丹2,3,4,5*，孙威江1,3,4,5*

1. 福建农林大学园艺学院，福建 福州 350002；2. 福建农林大学安溪茶学院，福建 泉州 362400；3. 福建省茶产业工程技术研究中心，福建 福州 350002；4. 海峡两岸特色作物安全生产省部共建协同创新中心，福建 福州 350002；5. 福建省茶产业技术开发基地，福建 福州 350002

叶绿素酶（Chlorophyllase，CLH）是叶绿素降解过程中的关键酶，将叶绿素a脱去植醇，形成脱植基叶绿素a。以白化茶树白鸡冠新梢叶片为材料，克隆获得3条基因cDNA全长序列，并进行生物信息学分析。结果表明，3条基因分布于2个亚家族，其蛋白质编码区（Coding sequence，CDs）长度为894～975 bp，编码氨基酸个数为297～324，蛋白质分子量为31.99～34.91 kDa，等电点为4.89～7.61，不稳定系数为38.94～48.24，其中CsCLH1.1和CsCLH1.2为不稳定蛋白，CsCLH2为稳定蛋白。Cell-PLoc亚细胞定位预测结果表明，3个CsCLHs蛋白均定位于叶绿体；而WolfPsort亚细胞定位预测结果显示，CsCLH1.1和CsCLH1.2定位于细胞质，CsCLH2定位于叶绿体。遮阴和恢复光照处理下的qRT-PCR结果显示，遮阴抑制白鸡冠叶片的表达，光照诱导白鸡冠叶片的表达。不同品种中表达模式分析表明，在白化叶中高表达。另外，酵母单杂交结果表明，可以与和启动子结合。综上所述，CsCLHs在白化茶树叶片中可能参与叶绿素降解，在叶片白化过程中发挥重要作用，结果可为进一步探究茶树CLH基因家族的功能及茶树叶片白化机理提供参考。

茶树；叶绿素酶；基因家族；表达差异

叶片白化是绿色植物叶绿素缺陷出现的表型[1-3]，植物白化通常会造成减产和品质下降[4-5]，但在白化茶树的叶片中有氨基酸含量高，儿茶素、咖啡碱含量低的特点[6-7]。……