郭晶晶，陈丹萍，董露斌，杨飞，胡双英

浙江中和司法鉴定中心，浙江宁波，315012

0 引言

目前，对毒品的主要检测技术有化学检验[1]、免疫学检测法[2]、薄层色谱分析法（TLC）[3]、气相色谱法（GC）[4]、高效液相色谱法（HPLC）[5]、气相色谱/质谱联用分析法（GC-MS）[6]等，其中质谱联用技术可以定性与定量检测环境中痕量多残留药物，具有快速、灵敏、简单的处理优点[7]。但已有报道主要以毛发、尿液等生物样本为研究对象，较少涉及生活污水。本研究建立了SPEHPLC-ESI-MS/MS技术分析生活污水中13种违禁药物的方法，并优化固相萃取柱，有效提高了对目标药物的回收率。该方法简便、定量限低、可靠性高，可应用于实际污水样品检测。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

岛津LCMS-8050高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱（日本岛津公司）；蠕动泵（重庆科耐普公司）；循环水真空泵（上海予华公司）；高速离心机（德国艾本德公司）；干式氮吹仪（宁波洛尚公司）；Oasis MCX固相萃取柱（美国Waters公司）；Oasis HLB固相萃取柱（美国Waters公司）；GF/CTM无黏合剂玻璃纤维滤纸（英国Whatman公司）。

1 3 种待测物及其氘代内标储备液均购于美国Cerilliant公司，包括可卡因（COC）、苯甲酰爱康宁（BZE）、氯胺酮（KET）、去甲氯胺酮（N K）、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺（MDMA）、3，4-亚甲基二氧基苯丙胺（M D A）、甲基苯丙胺（M A M P）、苯丙胺（AMP）、甲卡西酮（MC）、吗啡（MOR）、6-单乙酰吗啡（6-MAM）、可待因（COD）、美沙酮（TMD）以及它们的氘代内标。甲醇、乙腈均为色谱纯（美国Supelco公司），甲酸（50%）为色谱级（上海麦克林公司），乙酸铵为色谱纯（美国赛默飞公司），氨水为色谱级（上海阿拉丁公司），盐酸（市售分析纯）。

1.2 固相萃取方法

水样用盐酸调至pH 2.0，用真空抽滤装置进行过滤，滤膜选用GF/CTM无黏合剂玻璃纤维滤纸，过滤后取水样50mL，加入100μL的50ng/mL氘代内标工作液，混合均匀，待固相萃取。分别用甲醇1mL和pH 2.0的纯水1mL活化SPE萃取柱。50mL样品以2mL/min的速度上样；后用甲醇1mL淋洗；再用4%氨水-乙腈洗脱剂3mL洗脱（流速0.2mL/min）。收集洗脱液，在60℃下氮吹，用100μL甲醇溶液复溶，高速离心取上清液进HPLC-ESI-MS/MS分析。

1.3 色谱条件

色谱柱为Restek Allure® PFP Propyl（100mm×2.1mm，5μm）；流动相A为乙腈，B为20mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液，流动相比例为80%A、20%B；流速为0.35mL/min；柱温：30℃；进样量：5μL。

1.4 质谱条件

正离子模式（ES I+），多反应监测模式（MRM），离子源温度：400℃；离子喷雾电压：4000V；碰撞气氦气：270kPa；气帘气：10L/min；雾化气：3L/min；辅助气：10L/min；DL温度：250℃。13种化合物及其氘代内标的LC-MS/MS参数见表1。

表1 13 种化合物及其氘代内标的质谱参数

续表1

2 结果与讨论

2.1 固相萃取柱的优化

分别选用Oasis HLB柱、Oasis MCX柱与混合模式Oasis HLB+MCX，采用1.2固相萃取方法处理样品，得到目标药物的回收率见图1。

如图所示，选用Oasis HLB柱与Oasis MCX柱对NT、KET、6-MAM、MDA、MDMA、COC、TMD的回收率基本一致，而选用Oasis HLB柱对BZE药物的回收率要优于使用Oasis MCX柱，剩余其他5种药物的回收率则是选用Oasis MCX柱效果更佳。选用Oasis HLB柱、Oasis MCX柱与混合模式Oasis HLB+MCX对13种常见违禁药品的平均回收率分别为69.0%、77.9%与91.5%。使用混合模式Oasis HLB+MCX柱大大提高了对目标药物的回收率，则最终采用Oasis HLB+MCX柱。

2.2 精密度及准确度

分别配置5、100、400 3个浓度的质控样品，并按上述1.2处理样品，每一浓度进行6样本分析，连续测定3天，结果见下表2所示。在6次平行测定的情况下，相对标准偏差（RSD）均小于12%，准确度基本在（100±15）%以内，呈现良好的稳定性和准确性，可以满足污水中痕量违禁药物的分析要求。

表2 在不同浓度样品中13 种违禁药物的回收率，相对标准偏差以及准确度（n=6）

续表2

3 结语

本文建立了一种基于固相萃取-高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱（SPE-HPLCESI-MS/MS）联用技术定量分析生活污水中13种违禁药物的方法。优化固相萃取技术，选用Oasis HLB+MCX固相萃取柱，对目标药物的回收率高达91.5%，6次平行实验，相对标准偏差（RSD）均小于12%，准确度基本在（100±15）%之内。该方法操作简单、定量限低、重现性好，可以有效监测毒情发展情况，准确掌握毒品的滥用种类，预防和打击毒品犯罪，为禁毒工作的开展提供重要的技术支持。