李昀峰

（新宾满族自治县自然资源发展中心，辽宁 新宾 113213）

松杉灵芝Ganoderma tsugae[1]又名木灵芝、铁杉树芝，是我国东北主要林区特有的灵芝种类，多生长于针叶混交林、阔叶混交林中常见树种的腐木上，是名贵的中药材，其中所含核苷、微量元素、氨基酸、维生素、多糖、三萜类化合物、生物碱等多种有效成分[2-4]，对人体具有显著的药理作用[5-6]。我国灵芝药用至今已经有2 000 多年历史，并在20 世纪50 年代成功实现了灵芝人工栽培，至今已成为世界上主要生产和出口大国。硒是重要的生命元素，具有调节机体免疫力、延缓衰老、抗肿瘤等功效[7-8]。已有研究表明，灵芝具有较强的富集硒能力[9-10]，富硒灵芝兼备了灵芝与硒的生物活性，可以很好地提高其子实体的药理成分和生物活性[11-12]，进而提高灵芝的药用价值和经济价值。目前，对松杉灵芝富硒栽培的研究较少，本文通过对不同质量分数亚硒酸钠对松杉灵芝生长发育及富硒效应的影响研究，探讨松杉灵芝人工栽培过程中适宜的亚硒酸钠用量，为今后开展辽宁东部林区松杉灵芝富硒栽培研究提供工作基础。

1 材料与方法

1.1 试验地自然概况

栽培试验地位于抚顺新宾满族自治县猴石国家级自然保护区，地理坐标为124°27.15′E，41°40.33′N，保护区内峰峦突起，沟壑纵横，平均海拔500 m 左右，最高峰为碰子沟，海拔962 m。该区属北温带季风性大陆气候，气候宜人，雨量充沛，年均降水量750～850 mm。早晚温差大；冬季极度寒冷且持续时间较长，极端低温可达-38 ℃。该区森林资源茂盛，林下分布大量珍贵的野生食用菌资源，是食用菌产业发展的首选地区。

1.2 试验方法

试验设5 个亚硒酸钠处理，在栽培种培养基料中加入亚硒酸钠（Na2SeO3），每1 kg 培养基料分别加入0.2 g、0.4 g、0.6 g、0.8 g 和1.0 g 亚硒酸钠，对应的亚硒酸钠质量分数为0.2 g·kg-1、0.4 g·kg-1、0.6 g·kg-1、0.8 g·kg-1和1.0 g·kg-1，以未添加亚硒酸钠的基料为对照。各培养基料搅拌均匀，每个培养袋分别装入湿料2.5 kg，并进行标记，于123 ℃高温灭菌2 h，待温度降至30 ℃趁热取出，冷却后在无菌条件下接入灵芝原种，并做好标记。接种后，将培养基置于28 ℃培养室恒温培养，每天观察生长状况，待菌丝体满袋后，当菌料紧连不易掰开时，将成熟菌丝的菌袋进行林下仿野生人工栽培。收获时，松杉灵芝子实体生物量以5 袋培养基料子实体生物量平均值作为平均产量。

2 结果与分析

2.1 亚硒酸钠对松杉灵芝子实体产量的影响

施用外源物质能够影响松杉灵芝产量，由图1可知，当亚硒酸钠质量分数为0～0.6 g·kg-1时，松杉灵芝子实体产量随着硒质量分数的增大而增加，当亚硒酸钠质量分数为0.6 g·kg-1时，子实体产量达到最大值7.34 kg；但亚硒酸钠质量分数高于0.6 g·kg-1时，子实体产量明显下降；当亚硒酸钠质量分数为1.0 g·kg-1时，松杉灵芝子实体产量仅为4.64 kg，分别比对照、最大产量降低了10.76%和36.78%。

图1 亚硒酸钠对松杉灵芝子实体产量的影响

2.2 亚硒酸钠对松杉灵芝硒富集能力的影响

由图2 可知，对照常规仿生人工栽培松杉灵芝子实体中硒的含量仅1.5 μg·kg-1，适当增加亚硒酸钠质量分数，子实体硒含量逐渐增高，当亚硒酸钠质量分数为0.8 g·kg-1时，子实体中硒含量达到最高，为72.44 μg·kg-1；当亚硒酸钠为1.0 g·kg-1时，子实体中硒含量仅42.21 μg·kg-1，可见高质量分数硒抑制了子实体对硒的进一步吸收和生物转化。

图2 亚硒酸钠对松杉灵芝硒富集能力的影响

2.3 亚硒酸钠对松杉灵芝生长发育的影响

在仿生人工栽培条件下，亚硒酸钠对松杉灵芝子实体菌盖大小、厚度、色泽、形状等生长发育性状都有不同程度的影响（表1），低质量分数时对松杉灵芝的生长发育有一定促进作用，当质量分数过高时，则抑制其生长发育，影响松杉灵芝外观品质。较低质量分数下，松杉灵芝外观形状没有较大差异；当亚硒酸钠质量分数为0.8 g·kg-1时，菌盖变小、厚度变薄；当质量分数为1.0 g·kg-1时，松杉灵芝菌株受到的影响都较显著，子实体盖小，不均匀，连生畸形，颜色不均等。

表1 亚硒酸钠对松杉灵芝生长发育的影响

2.4 亚硒酸钠对松杉灵芝多糖含量的影响

由图3 可知，随着亚硒酸钠质量分数的增加，松杉灵芝多糖含量持续增加，当亚硒酸钠质量分数为1.0 g·kg-1时达到最大，菌盖和菌柄多糖含量分别为2.27% 和1.98%，分别较对照增加了49.34% 和39.00%。而后随着亚硒酸钠质量分数的增加，松杉灵芝菌盖和菌柄中多糖含量的增幅逐渐变小，当亚硒酸钠质量分数为1.0 g·kg-1和0.8 g·kg-1，分别比对照增加了0.89% 和0.51%。同时，菌盖和菌柄中多糖含量存在差异，不同质量分数亚硒酸钠处理的，菌盖中多糖含量均较菌柄要高，这可能是由于松杉灵芝多糖合成后主要富集于菌盖中，或者是多糖的合成主要是在菌盖中完成的。

图3 亚硒酸钠对松杉灵芝多糖含量的影响

2.5 亚硒酸钠对松杉灵芝蛋白质含量的影响

由图4 可知，低质量分数（0～0.6 g·kg-1）亚硒酸钠明显促进了松杉灵芝的蛋白质合成，且菌盖中蛋白质含量均高于菌柄。当亚硒酸钠质量分数为0.6 g·kg-1时，松杉灵芝的蛋白质含量达到最大，菌盖和菌柄中的蛋白质含量分别为11.51 mg·kg-1和11.12 mg·kg-1。超过此质量分数，蛋白质含量降低，当亚硒酸钠质量分数为1.0 g·kg-1时，菌盖和菌柄中蛋白质含量分别为7.75 mg·kg-1和7.60 mg·kg-1，分别比对照降低了11.93%和11.62%。

图4 亚硒酸钠对松杉灵芝蛋白质含量的影响

2.6 亚硒酸钠对松杉灵芝氨基酸含量的影响

由表2 可知，低质量分数（0.2～0.6 g·kg-1）亚硒酸钠处理，松杉灵芝子实体氨基酸含量随着质量分数升高而增加，当亚硒酸钠质量分数超过0.6 g·kg-1时，氨基酸含量随着质量分数的升高而降低，当亚硒酸钠质量分数达到1.0 g·kg-1时，氨基酸含量均比对照有所降低，这与亚硒酸钠对松杉灵芝蛋白质含量的影响变化接近一致，说明低质量分数的亚硒酸钠对松杉灵芝生长发育具有促进作用，而质量分数过高，则对松杉灵芝的生长具有一定的抑制甚至是毒害。

表2 亚硒酸钠对松杉灵芝氨基酸含量影响 mg·kg-1

续表2 亚硒酸钠对松杉灵芝氨基酸含量影响 mg·kg-1

3 讨 论

3.1 本研究表明，施用一定质量分数外源亚硒酸钠可促进松杉灵芝子实体生长，综合松杉灵芝对硒富集能力和亚硒酸钠对松杉灵芝生长的影响，施0.6 g·kg-1的外源亚硒酸钠，对灵芝子实体的生长具有促进作用，是灵芝栽培较为适宜的硒水平。

3.2 亚硒酸钠可以显著提高松杉灵芝的多糖含量，说明硒元素促进了多糖的合成；而硒对蛋白质的影响有着双重的机制，即低质量分数的硒可以促进蛋白质的合成，但继续提高培养基料中硒的添加量，则会影响氨基酸的合成，抑制子实体中蛋白质含量的增加。

3.3 在培养基中加入亚硒酸钠后，松杉灵芝通过生物富硒作用，增加了其子实体中硒元素含量，子实体中主要营养功能成分显著增加，从而在物质基础上提高了灵芝子实体的药理与保健价值，进而提高了松杉灵芝经济价值，本研究为松杉灵芝富硒栽培提供了科学依据，同时对松杉灵芝人工栽培产业的发展起到一定的推动作用。