邱明鸣，朱育凤，倪昌荣

（江苏省中医院，江苏 南京 210029）

前胡为常用化痰止咳药，始载于《名医别录》，临床应用历史悠久，具有降气化痰、散风清热功效，主要用于治疗痰热喘满、咯痰黄稠、风热咳嗽痰多等［1］。前胡为伞形科植物白花前胡Peucedanum praeruptorumDunn的干燥根，含有香豆素类、挥发油、黄酮、色原酮、苯丙衍生物等化学成分［2-7］，具有镇咳祛痰、抗心脑缺血、抗心衰、抗氧化、降血压等作用［8-9］。姚蓉等［10］对湖南市场的前胡药材进行检测，结果14批药材中含量符合药典标准的仅占35.71%。市售前胡药材按照2020版《中国药典（一部）》含量测定方法进行检测，大部分达不到药典要求，说明现行标准需要改进和完善。本研究中收集安徽、浙江、四川、湖南等地产的31批前胡药材样品，以白花前胡甲素和白花前胡乙素为指标性成分，参考2020年版《中国药典（一部）》前胡含量测定项下方法，建立了测定上述2种成分含量的高效液相色谱法，为制订前胡药材的质量标准提供参考。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 1260型高效液相色谱仪（美国Agilent公司），配有G1312B型二元泵、G1367E型高性能自动进样器、G1316A型柱温箱、G4212B型二极管阵列检测器、G1322A型脱气机；AX224ZH/E型电子天平（常州奥豪斯仪器有限公司，精度为十万分之一）；KQ-1000型医用超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，功率为300 W，频率为40 kHz）。

1.2 试药

白花前胡甲素标准品（批号为B20035），白花前胡乙素标准品（批号为B20037），均购自上海源叶生物科技有限公司，纯度均不低于98%；甲醇（色谱纯，Merck Lichrosolv Reag.ph eur，批号为jc20213088）；其他试剂均为分析纯，水为纯净水。前胡药材样品经江苏省中医院朱育凤主任中药师鉴定为正品，样品信息见表1。

表1 31批前胡药材样品信息Tab.1 Information of 31 batches of Peucedani Radix samples

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Agilent Eclipse-XDB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：水-甲醇（25∶75，V/V）；流速：1 mL/min；柱温：25℃；检测波长：321 nm；进样量：10 μL。理论板数按白花前胡甲素峰计应不低于3 000，色谱图见图1。可见，供试品溶液色谱中，在与混合对照品溶液色谱相应保留时间处有色谱峰出现。

1.白花前胡甲素2.白花前胡乙素A.混合对照品溶液B.供试品溶液图1 高效液相色谱图1.Praeruptorin A 2.Praeruptorin B A.Mixed reference solution B.Test solutionFig.1 HPLC chromatograms

2.2 溶液制备

取前胡药材样品粉末（过3号筛）0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷25 mL，密塞，称定质量，超声（功率为250 W，频率为33 kHz）10 min，放冷，再称定质量，用三氯甲烷补足减失的质量，摇匀，滤过；精密量取续滤液5 mL，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至25 mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，离心（转速为3 000 r/min）10 min，取上清液，用0.22 μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。取白花前胡甲素标准品1.49 mg和白花前胡乙素标准品1.45 mg，精密称定，加甲醇5 mL使溶解，配制成质量浓度分别为0.298 mg/mL和0.290 mg/mL的混合对照品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察：精密吸取2.2项下混合对照品溶液适量，按倍比稀释法（分别稀释2倍、10倍、50倍、100倍、625倍）稀释成系列浓度对照品溶液，按2.1项下色谱条件进样测定，以对照品溶液质量浓度（X，μg/mL）为横坐标、色谱峰峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为Y甲=16 504X甲+9.579 3（r=0.999 8，n=5）和Y乙=15 112X乙+28.403 1（r=0.999 9，n=5）。结果表明，白花前胡甲素和白花前胡乙素质量浓度分别在3.880 2～248.333 3 μg/mL和1.888 0～120.833 3 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取2.2项下混合对照品溶液10 μL，按2.1项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。结果白花前胡甲素和白花前胡乙素峰面积的RSD分别为0.22%和0.15%（n=6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取样品（批号为20201126）0.5 g，精密称定，按2.2项下方法制备供试品溶液，分别于0，2，4，6，8，10，12 h时按2.1项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果白花前胡甲素和白花前胡乙素峰面积的RSD分别为1.37%和1.08%（n=7），表明供试品溶液在12 h内稳定性良好。

重复性试验：取样品（批号为20201126）0.5 g，精密称定，共6份，按2.2项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并计算含量。结果白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量分别为1.16%和0.15%，RSD分别为0.57%和0.82%（n=6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：取已知含量的样品（批号为20201126）粗粉（过3号筛）0.5 g，精密称定，共6份，分别加入白花前胡甲素和白花前胡乙素对照品适量，按2.2项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并计算回收率。结果见表2。

表2 加样回收试验结果（n=6）Tab.2 Results of the recovery test（n=6）

2.4 样品含量测定

取31批前胡药材样品粗粉（过3号筛）各0.5 g，精密称定，每批各取3份，按2.2项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并计算干燥样品中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量。结果见表3。

3 讨论

本研究中收集的31批前胡药材样品来自安徽、浙江、四川、湖南等地，所建立的含量测定方法与2020年版《中国药典（一部）》前胡含量测定项下方法一致，规定按干燥品计算，含白花前胡甲素（C21H22O7）不得少于0.90%，含白花前胡乙素（C24H26O7）不得少于0.24%。由表3可知，31批前胡药材样品中，有24批白花前胡甲素含量合格，合格率为77.42%；仅10批白花前胡乙素含量合格，合格率为32.26%；白花前胡甲素和白花前胡乙素含量均合格的仅9批，占29.03%。按现行标准，70.97%的前胡药材判定为劣药，不能使用，前胡药材合格率低，无法满足临床用药需求。

表3 前胡药材样品含量测定结果（%，n=3）Tab.3 Results of content determination of praeruptorin A and praeruptorin B in the Peucedani Radix samples（%，n=3）

若以2020年版《中国药典（一部）》前胡含量检测项下要求的白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量之和（1.14%）为依据，则有23批合格，占74.19%，合格率大大提高，可缓解临床用药问题，故建议《中国药典（一部）》中以白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量之和1.14%设限，修订前胡含量测定项下标准。类似的不同产地药材质量的研究还有很多［11-13］，部分研究是在实际工作中发现问题，并进一步进行验证。如在实际工作中发现莲子心含量合格率低，王协和等［14］也做了相关研究，2020年版《中国药典（一部）》将莲子心的含量测定成分从莲心碱修订为甲基莲心碱后，莲子心含量基本能合格。王琦等［15］分析了大孔吸附树脂和离子交换树脂在药品检验标准中的应用情况，提出《中国药典》药品标准中需进一步规范树脂的使用，以提高标准的可行性。

综上所述，市售前胡药材质量参差不齐，合格率低，需要一个切合实际的质量控制方法来评价和控制其质量，以满足临床用药需求，可为2025年版《中国药典（一部）》中前胡相关标准的修订提供数据支持。