张 茹,李 萍,赵艳茹,杨 柳

(秦皇岛市第一医院 1.中医科；2.营养科；3.心理科,河北 秦皇岛066000)

抑郁症为常见的慢性精神性疾病，临床症状主要表现为情绪低落、行为缺乏主动和思维迟缓等，影响患者的生活质量[1-2]。西药是目前抑郁症的主要治疗手段，有些患者对西药治疗的耐受性和依从性较差，且治疗后仍然有很多患者残留认知损害等[3]。乌灵胶囊是国家新发现的一种纯中药制剂，该药多用于治疗脑卒中等器质性疾病伴发的抑郁状态，关于抑郁症的治疗效果少有研究证实[4]。BDNF是神经生长因子的家族成员之一，影响神经元的生长、存活及诱导分化[5]。已有研究表明，miR-381-3p沉默可以保护神经元，减轻抑郁症对神经元的损伤，很有可能成为治疗抑郁的潜在靶点[6]。抑郁症是一种与精神-神经-免疫失调相关的疾病，而TXA2可以收缩血管和呼吸道平滑肌、刺激血小板活化，进而影响抑郁症[7]。基于此，本文旨在研究，BDNF、miR-381-3p、TXA2在抑郁症中的表达及在乌灵胶囊干预效果评估中的价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象

本文选取于2020年3月-2021年3月在秦皇岛第一医院就诊的50例抑郁症患者为抑郁组，同时期在我院体检的50例健康人为健康组，两组患者年龄、性别、体质量、收缩压、舒张压、空腹血糖均无统计学差异(P>0.05)，见表1。

表1 两组患者一般资料比较

纳入标准：(1)符合美国精神病协会《精神障碍诊断与统计手册(第4版)》[8]的诊断标准；(2)能够理解和遵守研究要求；(3)汉密尔顿抑郁量表(Hamilton Depression Rating Scale，HAMD)评分≥17分；(4)近2周未患感染性、传染性及过敏性疾病；(5)本文研究患者及其家属均知情，签署知情同意书，经过我院伦理委员会批准。

排除标准：(1)脑器质性精神障碍；(2)患有严重的躯体疾病或神经系统疾病，近期外伤或近1周内有感染或发热者；(3)近3个月服用过影响认知功能的药物或激素类药物；(4)处于哺乳期或妊娠期的女性患者。

1.2 治疗方法

根据治疗方式将抑郁组又分为对照治疗组(23例)，乌灵胶囊治疗组(27例)；对照治疗组患者口服草酸艾司西酞普兰(生产厂家山东京卫制药有限公司生产，批号：1308205，规格：5 mg/片) 10 mg/d，根据治疗需要逐步调整剂量至10-20 mg/d。乌灵胶囊治疗组在此基础上加用乌灵胶囊(浙江佐力药业股份有限公司，生产批号20120521，规格：0.33 g/粒)每次0.99 g，每天3次，两组均治疗8周。

1.3 指标检测

1.3.1实时荧光定量PCR检测miR-381-3p、BDNF 采集所有研究对象入院第二天清晨空腹静脉血5 ml，以2 000 r/min离心15 min分离血清，提取miR-381-3p、BDNF总RNA，对提取总RNA的纯度、含量进行检测，随后逆转，逆转录处理后获得cDNA，获得cDNA后使用Primer5.0软件设计引物，内参U6。miR-381-3p引物序列：正义链：5’-TAATCTGACTACAAGGGCAAGCT-3’，反义链：5’-TATGGTTGTTCTGCTCTCTCTCTC-3’；BDNF引物序列：正义链：5’-CGTCGGATCCATGACCATCCTTACTATG-3’，反义链：5’-CGTCGATCCACTAGTACGCGTGATCCC-3’；内参基因U6引物序列：正义链：5’-CTCGCTTCGGCAGCACA-3’，反义链：5’-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3’,其余步骤按说明书严格进行。采用2-△△Ct方法计算出需要检测的miR-381-3p、BDNF相对表达量。

1.3.2放射免疫分析法检测TXA2 抽取所有入选者的空腹静脉血5 ml，取上清，采用放射免疫分析试剂盒(厂家：上海沪震实业有限公司，货号：hz-10047)检测TXA2表达，具体步骤严格按照说明书进行。

1.3.3检测5-HIAA、NE、DA 两组患者均采集入选第二天和治疗后第二天清晨空腹静脉血5 ml，以3 000 r/min离心10 min，半径5 cm分离血清，置-25℃冰箱保存待测，5-HIAA、NE、DA的含量使用美国ESA公司生产的5600A型高效液相色谱-4通道库仑化学检测器测定，所需试剂盒购自上海西唐生物公司，严格按照说明书进行。

1.3.4疗效评估[9]治疗后所有患者填写抑郁自评量表(Self-rating depression scale，SDS)，检测5-HIAA、NE、DA水平，量表评分<53分、5-HIAA≥0.22 μmol/L，NE≥50 ng/L，DA≥424 nmol/24 h，则表示该药有效，量表评分≥53分、5-HIAA<0.22 μmol/，NE<50 ng/L，DA<424 nmol/24 h则表示无效。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 BDNF、miR-381-3p相对表达及TXA2表达在两组患者中的比较

如表2所示，健康组BDNF、miR-381-3p相对表达量高于抑郁组，TXA2表达低于抑郁组(P<0.05),乌灵胶囊治疗组BDNF、miR-381-3p相对表达量高于对照治疗组，TXA2表达低于对照治疗组(P<0.05)。

表2 BDNF、miR-381-3p相对表达及TXA2表达在两组患者中的比较

2.2 BDNF、miR-381-3p、TXA2表达与抑郁自评量表及抑郁症相关指标的分析

如表3所示，5-HIAA≥0.22，NE≥50，DA≥424，抑郁自评量表<53时BDNF、miR-381-3p相对表达量升高，TXA2表达降低(P<0.05)。5-HIAA<0.22，NE<50，DA<424，抑郁自评量表≥53时BDNF、miR-381-3p表达降低，TXA2表达升高(P<0.05)。

表3 BDNF、miR-381-3p、TXA2表达与抑郁自评量表及抑郁症相关指标的分析

2.3 BDNF、miR-381-3p、TXA2表达对乌灵胶囊治疗效果的预测价值

如表4，与BDNF、miR-381-3p、TXA2单一预测相比，联合预测对乌灵胶囊效果预测效能较高(P<0.05)。三项联合检测灵敏度、准确度高于单一检测(P<0.05)，见图1。

图1 BDNF、miR-381-3p、TXA2表达对乌灵胶囊治疗效果的预测价值

表4 BDNF、miR-381-3p、TXA2表达对乌灵胶囊治疗效果的预测价值

3 讨论

抑郁症的病理机制复杂，严重危害人类的身心健康。国内外开展了许多关于抑郁症发病机制的研究，研究方向主要涉及神经递质、细胞信号转导通路、神经-内分泌系统、神经元营养与调亡、神经突触重塑等[10]。目前有研究表明，乌灵胶囊可改善抑郁症患者抑郁症状及各种躯体疾病伴发的抑郁状态，且安全性良好[11]。

BDNF表达与抑郁症的发生、发展有着密切联系，通过接受抗抑郁治疗可以增加该指标的表达，同时BDNF受多种微小核糖核酸分子的调控[12]。本研究显示，对于抑郁症患者使用乌灵胶囊干预后，有效者BDNF表达量高于无效者，同时该因子对于抑郁症具有一定的诊断价值，BDNF可以预测乌灵胶囊治疗效果。究其原因，乌灵胶囊可增强谷氨酸酶活性，促进脑部摄取谷氨酸、γ-氨基丁酸，增强大脑皮质γ-氨基丁酸受体的活性，BDNF是突触可塑性调节分子，其低表达可导致海马神经元萎缩和丧失，它还可以诱导谷氯酸释放和树突棘密度増加[13-14]。

本文研究结果表明，乌灵胶囊治疗的有效患者miR-381-3p表达高于无效患者，同时该因子对于抑郁症具有一定的诊断价值。乌灵胶囊具有益气养神、健脾养心、安神解郁的作用，乌灵胶囊药用成分主要为乌灵菌粉，同时含有赖氨酸、谷氨酸、γ-基丁酸等19种氨基酸，以及腺苷、多糖和钙、铁、锌等多种矿物元素[15]。miR-381-3p参与了多种肿瘤的发生、发展，同时调控神经干细胞增殖、分化，而BDNF作为miR-381-3p的靶向调控分子，其本身对神经损伤和修复具有重要作用[16-17]。有研究表明，过表达miR-381-3p可以促进BDNF相对表达，从而保护神经元，减轻皮质酮对神经元的损伤，并且抑郁程度越重指标表达越低[18]。

抑郁症发病时大脑出现相应的变化[19]。本研究中，对于抑郁症患者使用乌灵胶囊干预后，有效患者TXA2表达低于无效患者。TXA2是血栓素合成酶催化前列腺素环内过氧化物同分异构化的产物，主要是由血小板、白细胞所分泌合成，过表达时可促使机体大量释放肾上腺素，激活血小板，从而形成恶性循环，参与多种疾病的发生、发展[20-21]。有研究结果显示，TXA2在抑郁症患者的外周血中表达较高，随着疾病的加重表达逐渐升高，猜测其可能与抑郁症的发生、发展有关，成为抗抑郁症的潜在治疗靶点[22]。

综上所述，对于抑郁症患者使用乌灵胶囊干预后，有效患者BDNF、miR-381-3p表达较高；TXA2表达较低，该变化与使用乌灵胶囊治疗抑郁症的疗效有一定关系，三者联合检测对于抑郁症具有诊断价值，对于乌灵胶囊治疗效果有一定的预测价值，但是本文研究样本较少，还需进一步的探究。