鬼箭羽醇提取物通过阻止氧化应激和抑制TNF-α-NF-κB及TβR1-Smad2/3通路减轻兔肾缺血再灌注损伤*
2022-05-06陈明环王咏兰李相国吕慧芬黄德斌
陈明环, 王咏兰, 李相国, 吕慧芬, 黄德斌
(湖北民族大学风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室,湖北 恩施 445000)
目前肾移植面临的两大难题,就是“肾移植手术”和“术后移植肾存活或功能维持”[1],解决后者的重要路径之一就是减轻因肾缺血再灌注损伤(renal ischemia-reperfusion injury,RIRI)并诱发的一系列氧化-应激、信号通路启动的炎症反应等导致的移植肾功能损伤,甚至衰竭[2]。RIRI 的病理过程是早期移植肾血流量急剧减少,当后期血流恢复灌注时会造成非免疫性肾功能损伤甚至功能丧失,同时大大增加移植后血栓形成和感染风险[3]。因此,要减轻肾移植后RIRI,应在深入研究RIRI 对移植肾的影响及其机制的同时,积极从动物实验探寻干预RIRI 的新型药物。鬼箭羽乙醇提取物(ethanolic extracts ofEuonymus alatus,EEEA)是中药卫矛科植物卫矛(Euonymus alatus)翅状物的乙醇提取物,我们曾研究证实,该药具有抗氧化应激、脑缺血再灌注、肝损伤等多种作用[4]。在本研究中,我们发现EEEA 对RIRI家兔的肾功能具有明显的保护作用,可能具有减轻肾移植后RIRI的临床应用价值。
材料和方法
1 材料
蛋白转印仪、垂直电泳仪及多色荧光成像系统(Bio-Rad);TL988-IV PCR 仪(ABI,QuantStudio 6);青霉素(华北制药,F7022115);地塞米松(dexamethasone,Dex)磷酸钠注射液(华中药业股份有限公司);兔白细胞介素 2/6(interleukin-2/6,IL-2/6)ELISA 试剂盒(CUSABIO);兔超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所);抗兔GAPDH 多克隆抗体(杭州贤至生物有限公司);抗兔转化生长因子 β 受体1(transforming growth factor β receptor 1,TβR1)单克隆抗体(Abcam);抗兔核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)P65 和磷酸化 P65(phosphorylated P65,p-P65)多克隆抗体(Bioss)。
2 方法
2.1 EEEA 的制备[4]8~9 月采于湖北恩施新塘野生卫矛(Euonymus alatus)的翅状物,经湖北民族大学中药学专家鉴定,清洗晾干备用。……
