智 越，李 哲，姜志广，康晓霞

（1.巴彦淖尔市产品质量计量检测中心，内蒙古巴彦淖尔 015000；2.燕京啤酒内蒙古金川有限公司，内蒙古巴彦淖尔 015000）

乙醛是啤酒中含量最高的醛类，其含量高低直接影响了啤酒的品质。乙醛含量较高会给啤酒带来青苹果和辛辣的青草味，造成其口感的不协调。另外，饮用乙醛含量较高的啤酒易会引起“上头”等不舒适的生理反应[1]。

针对乙醛含量影响啤酒质量的问题，研究者以气相色谱法为主，对啤酒酿造过程及原料中风味物质进行了分析研究，结果表明，气相色谱法中采取直接进样，方法简便、制备损失小且无污染[2-4]。苗延林等[5]多次尝试用直接进样法对啤酒中风味物质进行分析。但由于啤酒黏度较大，其中的不挥发物质会对色谱柱造成污染，在后来的发展中，较少采用直接进样法，一般要进行预处理，并采用顶空分析法[6]。

本试验采用顶空气相色谱法对啤酒中的乙醛进行测定，该方法简单易行，能有效降低样品基质的影响，减少材料消耗，同时可以及时、有效地控制啤酒生产工艺中乙醛的含量，提高啤酒质量，为啤酒生产日常质量监测、工艺改进及监管部门相关检测人员提供了可靠的参考依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

气相色谱仪：Aglient 7890B-7697A顶空气相色谱仪；氢火焰离子化检测器（Flame Ionization Detector，FID）；色谱柱：安捷伦125-7332气相色谱柱 DB-WAXETR（30 m×0.53 mm，1.0 μm）；电子天平：梅特勒-托利多，ML204T/02型；高纯氮气：大连大特公司，99.999%。

1.2 材料与试剂

啤酒：金川啤酒（批号：20210824，10P，燕京啤酒内蒙古金川有限公司）；无水乙醇：天津市科密欧化学试剂有限公司，色谱纯，≥99.7%；乙醛：上海麦克林生化科技有限公司，色谱纯，≥99.5%；正丁醇：上海阿拉丁生化科技股份有限公司，色谱纯，≥99.7%。

1.3 试验方法

1.3.1 溶液的配制

①乙醇-水溶液（40%体积分数）：按2∶3（体积比）量取乙醇和纯水混匀，该溶液需冷却后使用；②乙醛标准储备液（1.0 g/L）：乙醛经冷冻后，准确称取50 mg于50 mL容量瓶，用40%乙醇水溶液定容至刻度后摇匀。③正丁醇标准使用液（内标，2.0 g/L）：将正丁醇恢复至室温，准确移取正丁醇125 μL标准品于50 mL容量瓶，用40%乙醇水溶液定容至刻度后摇匀。标准储备液、使用液的实际浓度需按照标准品的纯度和密度进行折算，于4 ℃条件下避光、冷藏保存期限2个月。

1.3.2 标准曲线的制备

分别吸取乙醛标准储备液（1.0 g/L）10 μL、25 μL、50 μL、100 μL 和 150 μL 于装有 5 mL 啤酒（基质）样液的顶空瓶中，配制成浓度为2 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L和30 mg/L的标准曲线；分别加入正丁醇标准使用液（内标，2.0 g/L）0.1 mL，内标浓度为40 mg/L，压盖密封。

1.3.3 试验步骤

（1）样品处理。将待测样品直接倒入比色管中取样，比色管用待测酒样润洗2～3次。

（2）移除泡沫。取样5 mL，取样需用吸管把顶端泡沫移除干净，再继续吸取多余酒样，使酒液凹液面位置与比色管刻度线平齐。

（3）转移样品。将比色管中样品倒入顶空瓶中，停留8～10 s，以确保取样量的精确性。

（4）加入内标。用移液器准确移取0.1 mL正丁醇标准使用液至顶空瓶中。移液器枪头尖端可能会残留部分内标溶液，使其全部转移到顶空瓶中。

（5）压盖密封。压盖密封后检查瓶盖是否可以转动，若可以转动，需重新压盖。轻轻振荡顶空瓶使内标溶液与酒液混匀，待测。注意振荡时避免酒液接触密封垫片。

1.3.4 仪器条件

（1）顶空进样条件。样品瓶平衡温度50 ℃；定量环温度100 ℃；传输线温度120 ℃；样品瓶体积20 mL，样品平衡时间25.0 min；样品瓶填充时间0.14 min；定量环体积1.0 mL，定量环平衡时间0.05 min；进样持续时间0.50 min；样品瓶填充压力139.28 kPa。

（2）色谱条件。载气流速为5 mL/min，恒定压力模式，氢气流速30 mL/min，空气流速400 mL/min；进样口温度为150 ℃；检测器温度为200 ℃；程序升温条件为起始温度35 ℃，以10 ℃/min速率升至135 ℃，再以5 ℃/min速率升至150 ℃，最后以10 ℃/min速率升至180 ℃，保持5 min；采用分流进样，分流比2∶1。

2 结果与分析

2.1 专属性试验

按1.3.3试验步骤进样，记录目标物乙醛和内标物正丁醇色谱图，如图1。结果表明，乙醛和正丁醇出峰均峰形良好，分离度很好，保留时间分别为2.083 min和6.930 min，峰周围均无干扰峰，专属性良好。

图1 样品色谱图

2.2 标准曲线

按1.3.2中方法进样，记录色谱图，各浓度已扣除啤酒（基质）样液中乙醛含量本底，以乙醛各系列标准溶液与内标溶液色谱峰面积的比值为纵坐标，以乙醛各系列标准溶液浓度与内标浓度的比值为横坐标，绘制标准曲线图，见图2。得到线性方程为y=1.224 55x+0.001 53，相关系数为0.999 8，乙醛在2～30 mg/L线性关系良好。

图2 标准曲线图

2.3 重复性及检出限

平行测定6份啤酒样品中乙醛的含量，结果显示重复性试验RSD为1.6%，并通过3倍信噪比计算得出检出限为0.1 mg/L，结果如表1。

表1 重复性（n=6）及检出限结果表

2.4 回收率

对啤酒样品进行加标，加入3个浓度水平（5 mg/L、15 mg/L、25 mg/L）各2份，共6份。结果显示回收率范围在83.8%～95.5%，方法准确度较高，结果见表2。

表2 回收率结果

3 结论

经过分析研究和实践测定表明，用顶空气相色谱法测定啤酒中乙醛的含量，内标法定量，方法操作简单、灵敏度高、结果准确度高，适用于啤酒中乙醛含量的测定，为啤酒生产日常质量检测、工艺改进及监管部门相关检测人员提供了可靠的参考依据。