壮骨健膝方含药血清对脂多糖诱导兔膝滑膜巨噬细胞炎症反应的效应浓度研究
2022-04-21郭洁梅张英杰苏友新
林 震,郭洁梅,陈 鹏,肖 艳,张 鹏,张英杰,苏友新*
(1.福建中医药大学康复医学院,福建 福州 350122;2.福建卫生职业技术学院,福建 福州 350101;3.福建中医药大学中医学院,福建 福州 350122)
90%膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者伴有不同程度的滑膜炎症,且滑膜炎症贯穿KOA发病的始终,其炎症进展与KOA的病情发展呈正相关[1]。课题组前期从动物组织层面展开了研究,发现具有“痹痿同治”功效的壮骨健膝方可有效抑制兔KOA滑膜炎症[2-4]。滑膜巨噬细胞作为KOA滑膜炎中的主要参与者[5],可用于壮骨健膝方抗炎功效的研究。血清药理学是以机体含药血清代替药物干预细胞的实验方法,被广泛应用于中药复方的机制研究[6]。然而不同浓度的含药血清对细胞的影响是多样的[7],高浓度血清在起效的同时可能会对细胞产生毒性作用,低浓度血清可能由于药效物质浓度较低,达不到起效浓度,从而出现假阴性结果。因此在开展含药血清干预细胞的相关研究时,有必要对效应浓度进行摸索。故本研究通过CCK8法和ELISA法研究壮骨健膝方含药血清干预LPS诱导兔膝滑膜巨噬细胞炎症反应的效应浓度,为后续相关实验提供依据。
1 实验材料
1.1 实验动物与细胞 3月龄普通级新西兰大白兔12只,体质量(2.0±0.25)kg,由上海市松江区松联实验动物场提供,许可证编号:SCXK(沪)2017-0008。委托福建中医药大学实验动物中心代购并饲养,许可证号:SYXK(闽)2014-0006。兔膝滑膜巨噬细胞由上海青旗生物技术发展有限公司提供,货号:BFN2101831。
1.2 实验药物 壮骨健膝方组成:骨碎补15 g,杜仲9 g,川牛膝12 g,生地黄15 g,独活6 g,鸡血藤15 g,秦艽9 g,徐长卿9 g,土鳖虫6 g。……
