郑亚洲，杨泽宇，刘梦梦，李苗，黄礼年

（蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科，安徽 蚌埠 233004）

肺癌是临床最常见的肿瘤之一，也是恶性肿瘤患者死亡的主要原因之一。近年来，肺癌的发病率及死亡率逐年上升，肺癌包括小细胞肺癌及非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC），其中NSCLC 约占肺癌的80%以上［1-2］，NSCLC 包括鳞癌、腺癌、大细胞癌等。血清和糖皮质激素调节蛋白激酶3（serum and glucocorticoid-regulated protein kinase 3，SGK3）属于SGK家族，是一种普遍表达的丝氨酸/苏氨酸激酶，研究表明SGK3在功能上与AKT 平行，通过调节细胞增殖、生长、存活、迁移参与肿瘤的恶性转化［3］。研究表明，SGK3 在前列腺癌、乳腺癌等肿瘤组织中表达［4-6］，但是在肺癌组织中的表达的文献较少。本研究回顾性分析2014年1月至2018年12月于我院经病理组织学确诊的134 例NSCLC 患者的临床资料，分析SGK3在癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 回顾性分析2014年1月至2018年12 月于我院经病理组织学确诊的134 例NSCLC 患者的临床资料，其中男90例，女44例；年龄36～85 岁，平均（61.68±9.55）岁；鳞癌51 例，腺癌83 例。记录134 例NSCLC 患者的性别、年龄等临床资料，病理类型、分化程度、肿瘤直径、TNM分期等病理资料。本研究经医院伦理委员会批准，并经患者知情同意。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：患者均经术后病理组织学确诊，术前未接受放疗或化疗或靶向药物治疗。排除标准：排除合并肺部其他感染性疾病、其他恶性肿瘤、严重肝肾疾病、自身免疫系统疾病及代谢性疾病者。

1.3 试剂来源 兔抗人SGK3 抗体（ab218251）购于美国Abcam公司，通用免疫组织化学SP试剂盒购于南京沐宝生物技术有限公司。

1.4 方法 采用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织（距离癌组织＞5 cm的组织）中SGK3的表达情况。常规石蜡包埋组织切片，玻片烘干，然后在二甲苯中脱蜡，再通过一系列浓度梯度乙醇脱水。免疫组织化学染色的操作步骤按产品说明书进行。SGK3（1∶100）阳性染色呈棕黄色颗粒状，主要表达于细胞浆。切片在双盲情况下由2名高年资病理科医师独立阅片。结果判定按照半定量积分法［7］：（1）每例标本随机观察5 个（×400）高倍视野，计数阳性细胞数占细胞总数的百分比：阳性细胞数为0 则计为0 分，≤25%计1 分，26%～50%计为2分，51%～75%计为3分，＞75%计为4 分；（2）按染色强度评分：无染色计为0分，淡黄色计为1分，棕黄色计为2分，棕褐色计为3 分；根据（1）、（2）两项积分之和：0～2 分为阴性，3～7分为阳性。

1.5 统计学方法 采用SPSS 24.0 软件进行统计学分析，计数资料采用［n（%）］表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 SGK3 在NSCLC 癌组织及癌旁组织中的表达比较 SGK3 在NSCLC 癌旁组织中低表达，在癌组织中主要表达于细胞浆，阳性染色呈棕褐色颗粒状，见图1。SGK3在NSCLC癌组织的表达水平为67.9%（91/134），明显高于癌旁组织表达的3.7%（5/134），差异有统计学意义（χ2=120.042，P＜0.01）。

图1 SGK3在NSCLC癌组织（A）中高表达和癌旁组织（B）中低表达（HE染色，×400）

2.2 SGK3的阳性表达与临床特征的相关性 SGK3的阳性表达与NSCLC患者的年龄、性别、病理类型、肿瘤直径、分化程度均无相关性（P＞0.05），与TNM期及淋巴结转移相关（P＜0.05），见表1。

表1 SGK3阳性表达与NSCLC临床特征的相关性

续表1

3 讨论

NSCLC 作为常见的肿瘤，目前常见的治疗方法包括放疗、化疗、靶向药物治疗及手术等，早期NSCLC 主要以手术治疗，但30%～70%的患者在就诊时已处于Ⅲ～Ⅳ期［8］，因此肺癌的早期发现尤为重要。

磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide-3-kinase，PI3K）途径是人类癌症中最常见的改变途径之一［9］，PI3K 促进肿瘤的发生主要是通过激活AKT，AKT是一个高度同源的丝氨酸/苏氨酸激酶家族，具有多种参与细胞的靶点［10］。SGK家族是一种普遍表达的丝氨酸/苏氨酸激酶，由三种同种SGK1、SGK2、SGK3 组成，与AKT 家族高度同源，有研究称SGK3 为第二个AKT［3］，具有与AKT相似的底物特异性［11］，SGK3具有2个关键的调控位点：催化结构域的活化环中的苏氨酸残基（SGK3中的Thr 320）和C端疏水基序中的丝氨酸残基（SGK3 中的Ser 486），2 个位点都需要磷酸化才能完全激活［8，12］，参与PI3K途径的转化，涉及细胞生长增殖，可以推测SGK3 在功能上与AKT 平行，通过调节细胞增殖、生长、存活、迁移参与肿瘤的恶性转化。本研究采用免疫组化法检测NSCLC 癌组织及癌旁组织中SGK3 的表达情况，发现SGK3 在NSCLC 癌组织的表达明显高于癌旁组织，并且SGK3 的表达与NSCLC 的表达与TNM 分期、淋巴结转移有关，提示SGK3 可能参与了NSCLC的细胞增殖、生长、迁移及肿瘤的恶性转化。据报道，在肝癌中发现SGK3扩增和过表达，并能促进肿瘤细胞增殖［13］。有研究表明，PDPK1（Phosphoinositide-dependent Kinase-1）通过SGK3 信号介导前列腺癌细胞的存活，内源性PDPK1在前列腺癌细胞中的敲除显著降低了SGK3的磷酸化水平［5］。有文献表明，在乳腺癌中SGK3过表达，增强凋亡和侵袭相关基因和蛋白，从而导致乳腺癌细胞的肿瘤发展和侵袭［14］；用pEGFPN1-SGK3 质粒转染MDA-MD-231 细胞以高表达SGK3，促进了乳腺癌肿瘤生长和癌细胞的侵略性［4］；在黑色素瘤中，miR-605通过在黑色素瘤中负调控INPP4B介导的SGK3 活化而起肿瘤抑制作用［15］；SMAD2 和SGK3 在NSCLC 癌变组织中呈高表达，有淋巴结转移时，SMAD2 和SGK3 高表达率均上升［16］，本研究结果与该研究结果相似。

综上所述，SGK3 可能参与了NSCLC 的发生及发展过程，因此，检测NSCLC 癌组织中SGK3的表达，为NSCLC 的靶向治疗提供了一定的依据，SGK3 能否成为治疗NSCLC 的潜在新靶点仍需进一步探讨，关于SGK3是通过何种机制发挥作用仍需做进一步的实验研究。