薛运波│文 李志勇│图

1 .单雄单雌授精

用1 只雄蜂精液给1 只蜂王进行人工授精的方法称为单雄单雌授精，这是研究中常用的一种技术。雄蜂是单倍体，在精子形成时没有进行减数分裂，仍然是16 条染色体。因此，1 只雄蜂所产生的所有精子在遗传上是一致的，单雄授精蜂王所产生的雌性后代比多雄授精蜂王产生的雌性后代在亲缘关系上更近一层，属于超同胞。

操作方法：采集精液前授精针头内充满生理液，首先，授精针头内吸入一个小气泡，然后吸入1～2μl含有抗菌素的生理液，最后再吸入雄蜂精液（图1）。授精时，把精液同气泡前部的生理液一同注入蜂王的侧输卵管内。次日，单雄授精的蜂王再次麻醉10分钟。

图1 单只雄蜂的精液

2 .单雄多雌授精

用1 只雄蜂的精液给多只蜂王进行人工授精的方法称为单雄多雌授精。这种方法可以使不同的蜂王得到遗传学完全一致的精子。

单雄多雌授精有两种方式：一种是采集1 只雄蜂的精液稀释后分别给同一代次的多只蜂王进行授精。用此方法可以从这些蜂王的后代工蜂中观测出这些蜂王的亲缘关系；另一种方式是利用1 只雄蜂的精液连续给F1、F2、F3 后代雌性进行授精。用这种方法不仅使每世代的间隔时间缩短，同时还能得到遗传非常接近父本的后代。

3 .自体授精

处女蜂王性成熟以后，用二氧化碳每天麻醉10分钟，连续麻醉3 天，诱入到有雄蜂脾的核群中，促使其产下未受精卵。未受精卵经过核群中的工蜂哺育，发育成雄蜂。雄蜂出房8 天左右，幽闭控制该蜂王产卵，使其生殖道排空，雄蜂性成熟后进行采精，用该蜂王所产雄蜂精液给自体授精，从而达到自体授精的目的。

4 .产卵蜂王再授精

Harbo（1985）曾经断言，已经交尾产卵的蜂王（自然交尾或人工授精），一经再次注射精液就会死亡。但我国学者试验表明：已经开产的授精蜂王经过囚禁，腹部收缩，可以成功进行再次授精，尤其是在利用它所产的后代雄蜂的精液搞补偿性授精时，效果不错。

5 .混合精液授精

蜜蜂混合精液的人工授精技术是将几个蜜蜂品种（品系、配套系等）的雄蜂精液均匀混合后给处女蜂王进行授精，主要用于蜜蜂杂种优势的利用方面。其主要技术环节是精液在无菌环境下均匀混合。方法：分别采集不同蜜蜂品种（品系、配套系等）的雄蜂精液，在超净工作台或者特制的无菌箱内（图2），将各自雄蜂精液按比例或数量加入到事先净化灭菌的混合管内，用毛细管混匀器按同一个方向慢慢转动，转速大约为5～10r/s，避免来回转动和产生气泡，以防损伤蜜蜂精子，蜜蜂精液混匀大约2分钟左右即可。再用人工授精仪的进样器将混合好的精液吸入授精针头内进行人工授精。

图2 便携式授精混合设备

6 .从雄蜂贮精囊收集精子进行人工授精

当迫切需要从1 只特殊的雄蜂得到精液，而用通常的方法挤压雄蜂又无法得到精液时，可以从雄蜂贮精囊收集精子进行人工授精，这种方法获得的精液数量可以满足最低限度的授精需要。这种授精方式有两种取精方法：一是取出贮精囊（图3），通过挤压迫使精液排出，用注射器直接收集起来；二是将贮精囊放入尖底离心管中，加入少量生理液后，迫使贮精囊排出精液，收集混入精液的生理液，进行人工授精。

图3 解剖雄蜂贮精囊

7 .用来自1只蜂王受精囊的精子给另一只蜂王授精

这一技术是进行配子回交或只回收贮存在另一只蜂王的精子时应用，处女蜂王可以成为贮存精子的场所。方法是从供精蜂王取出受精囊（图4），去除受精囊外围包被物，用细针刺穿它，然后用注射器收集精液，最后按照通常的方法授精。

图4 密被微气管的受精囊

8 .冷冻精液授精

蜜蜂是典型的营群体生活的社会性昆虫。在高寒山区，越冬雄蜂的寿命只有8 个月以上，给蜜蜂育种、保种等方面带来很大困难。为此，长期贮存蜜蜂精液，实行蜜蜂冷冻精液人工授精，是解决蜜蜂精液利用受到季节、雄蜂寿命等限制问题的有效途径。有利于蜜蜂良种遗传资源的保护和利用以及蜜蜂引种、血统更新等，具有重要意义。