马国斌，赵晓宏，赵 鹏，杨 冰

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)是一种累及肝脏实质的特发性疾病，以血清γ-球蛋白增高和对免疫抑制剂治疗应答为临床特点[1]。相关研究指出，由Treg细胞分泌的白介素-35(interleukin-35，IL-35，又称为EB病毒诱导蛋白3，Epstein-Barr virus-induced gene 3，Ebi3)与多种自身免疫性疾病的发生密切相关[2]。IL-35是IL-12家族成员，由Ebi3蛋白和p35亚基组成异源二聚体，可直接发挥免疫抑制作用，并能调节Treg细胞分化，抑制Th17细胞亚群分化和增殖，进而可对过度免疫反应起到一定的抑制作用。有学者发现，髓样抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells，MDSCs)百分比异常与肝癌的发生存在密切的关联[3]。MDSCs是髓系来源的异质性细胞，由骨髓祖细胞与未成熟的骨髓细胞组成，为免疫调节细胞，可负性调节适应性免疫应答[4]，但目前对于IL-35和MDSCs与AIH发病的关系尚处于探索阶段。本研究检测了AIH患者肝组织IL-35表达和外周血MDSCs百分比变化，以探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2017年5月～2020年2月我院收治的AIH患者35例，男5例，女30例；年龄为34～59岁，平均年龄为(45.1±6.8)岁。符合《自身免疫性肝炎诊断和治疗共识(2015年)》[5]中关于AIH的诊断标准。排除标准：(1)严重的心脑血管疾病；(2)合并乙型肝炎病毒或丙型肝炎病毒或人类免疫缺陷病毒感染；(3)肝硬化；(4)既往有肝脏手术史；(5)存在其他严重的免疫系统疾病；(6)存在恶性肿瘤。

1.2 肝组织IL-35表达检测 常规肝穿刺活检取得肝组织，自液氮冻存管中取出肝组织，用生理盐水洗涤，取100 mg，加入细胞裂解液100 μL和蛋白酶抑制剂2 μL，充分匀浆，于液氮中冻融3次，低温高速离心后取上清液60 μL，应用蛋白定量试剂盒进行蛋白定量分析。……