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敲低miR-21-3p抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移及侵袭

2022-03-21陈彬彬

关键词:肺癌检测

陈彬彬,陈 丹

[湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)呼吸三科,湖南 长沙 410016]

微小核糖核酸(miRNA)是近年来发现的一类长度为20~23个核苷酸的内源性单链非编码小分子RNA,通过和靶基因mRNA碱基配对,引导沉默复合体降解mRNA或阻碍其翻译,与多种肿瘤的发生均密切相关[1]。miR-21-3p生物学功能多样,包括调节肿瘤细胞增殖、迁移、凋亡及分化等过程。随着研究的深入,miR-21-3p可能成为新的肿瘤标志物,并为肿瘤的基因治疗提供新靶点[2]。然而,miR-21-3p调控非小细胞肺癌(non-small-cell carcinoma,NSCLC)的详细机制仍有待进一步研究。CTD小磷酸酶样蛋白(CTDSPL)是一种抑癌基因,其在各种原发性肿瘤和继发性肿瘤中常被发现失活[3]。本研究旨在探讨miR-21-3p对NSCLC细胞增殖、迁移及侵袭的影响,以及其与CTDSPL的初步关系,现将研究报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 临床样本收集2018年5月至2019年12月湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)收治的未进行过放化疗并接受肿瘤切除术的16例T2期NSCLC患者的肿瘤组织和癌旁组织。本研究经院内医学伦理委员会批准,且所有患者对本研究知情并签署知情同意书。

1.1.2 细胞正常人肺上皮细胞(BEAS-2B)和NSCLC细胞株A549和H1975均来自中科院上海细胞库。

1.1.3 主要试剂胎牛血清和洛斯维公园纪念研究所 -1640(RPMI-1640)培养基(美国Gibco公司);miR-21-3p模拟物(mimic) / 抑制剂(inhibitor)和阴性对照(miR-NC)(上海吉玛制药技术有限公司);Lipofectamine 2 000试剂和Trizol试剂(美国Invitrogen公司);靶向抑制CTDSPL表达的shRNA(sh-CTDSPL)和阴性对照载体(sh-Con)(上海生工生物工程股份有限公司);PrimeScript RT试剂盒(北京天根生化科技有限公司);端粒酶活性荧光实时定量PCR法检测试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司);……

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