李向新，蒋 丹，刘建朝，苏文清，张 洁，张 珏

(1.唐山市水产技术推广站，河北 唐山 063000；2.唐山市曹妃甸区农业农村局，河北 唐山 063000；3.唐山市丰南区农业农村局，河北 唐山 063000)

2001 年唐山市引入南美白对虾进行小规模池塘养殖试验，2003 年开始在全市范围内进行全面推广，目前已成为唐山市对虾养殖主要品种之一，养殖面积达10 万余亩，年产量1.5 万吨以上。养殖模式由单一的池塘养殖发展为池塘养殖、盐田晾水池养殖、小棚养殖、工厂化养殖等多种模式。随着南美白对虾养殖的迅猛发展，苗种产业也快速发展起来。经调研，唐山现拥有南美白对虾苗种场近百家，育苗水体约18万米3，年产虾苗200多亿尾，除满足唐山的苗种需求外，还销往天津及河北省周边地市。由于唐山地处温带，南美白对虾繁育的成本较高，因此唐山的南美白对虾苗种场主要从海南、广东、福建等地引进P5仔虾进行标粗，苗种品质无法把控。

为了解和掌握南美白对虾苗种主要疫病的基本状况，对唐山市水生动物疫病风险评估、疫病预警、疫病防控及水产苗种产地检疫提供科学依据，2018－2020 年唐山市水产技术推广站针对目前常见及影响最大的白斑综合征(White spot disease，WSD)、传染性皮下及造血器官坏死病(Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis，IHHN)、急性肝胰腺坏死病(Acute hepatopancreatic necrosis disease，AHPND)、虾肝肠胞虫病(Enterocytozoon hepatopenaei disease，EHPD)、虾虹彩病毒病(Shrimp hemocyte iridescent virus disease，SHIVD)共 5 种疫病及新发重大疾病，开展了唐山市南美白对虾苗种专项疫病监测工作，从每年的4月下旬开始至5月下旬结束，3 年累计监测苗种场294 批次，检测苗种样品1 400份。

一、材料和方法

1.样品来源

样品来自唐山市南美白对虾苗种主产区，主要集中在丰南区和曹妃甸区。按照《水生动物产地检疫采样技术规范》(SC/T 7103－2008)的规定进行随机抽样，每份样品的数量不少于150尾，将采集的南美白对虾苗装入一次性无菌采样袋中，密封编号后低温保存，运输至实验室。

2.样品前处理

将采集的虾苗样品研磨后装入无DNase 和RNase 的离心管中，直接检验或-20℃下冷冻保存备检。

3.主要试剂和仪器设备

(1)主要试剂：DNA 提取试剂盒(TOYOBO，日本)、一步法荧光定量PCR 试剂盒(QIAGEN，德国)、2×Taq Master Mix(Generay，上海)、引物及探针(Generay，上海)、阳性标准物质(中国水产科学研究院黄海水产研究所)。

(2)主要仪器设备：实时荧光定量PCR 仪(ABI Q3)、 梯 度 PCR 仪 (ABI Veriti 96、 BIO- RAD T100)、台式冷冻离心机(eofuge 13R)、水平电泳仪(BG-subMIDI)、凝胶成像系统(Azure C200)等。

4.检测方法

虾类疫病检测方法详见表1。

表1 虾类疫病检测方法

二、结果与分析

1.苗种场监测情况

2018－2020 年累计监测南美白对虾苗种场294 批次，检出阳性场86 批次。2018 年监测苗种场70批次，检出阳性场10批次，阳性场检出率为14.29%；2019 年监测苗种场99 批次，检出阳性场24 批次，阳性场检出率为24.24%，比上年增长9.95 个百分点；2020 年监测苗种场125 批次，检出阳性场52 批次，阳性场检出率为41.60%，比上年增加17.36个百分点。

2.苗种检测情况

2018－2020 年累计检测南美白对虾苗种1 400 份，检出阳性样品103 份。2018 年检测样品280 份，检出阳性样品14 份，阳性样品检出率为5.00%；2019 年检测样品495 份，检出阳性样品27 份，阳性样品检出率为5.45%，比上年增长0.45 个百分点；2020 年检测样品625 份，检出阳性样品62份，阳性样品检出率为9.92%，比上年增长了4.47个百分点。

(1)白斑综合征病毒(WSSV)检测。3 年累计检测样品294份，检出阳性样品2份。2018年检测样品70 份，检出阳性样品2 份，阳性样品检出率为2.86%；2019 检测样品99 份，检出阳性样品0 份，阳性样品检出率为0，同比下降2.86 个百分点；2020年检测样品125份，检出阳性样品0份，阳性样品检出率为0，同比持平。

(2)传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)检测。3 年累计检测样品294 份，检出阳性样品26 份。2018 年检测样品70 份，检出阳性样品6 份，阳性样品检出率为8.57%；2019 年检测样品99 份，检出阳性样品8 份，阳性样品检出率8.08%，同比下降0.49个百分点；2020年检测样品125 份，检出阳性样品12 份，阳性样品检出率为9.60%，同比上升1.52个百分点。

(3)急性肝胰腺坏死性弧菌(VpAHPND)检测。3 年累计检测样品294 份，检出阳性样品4 份。2018 年检测样品70 份，检出阳性样品1 份，阳性样品检出率为1.43%；2019 年检测样品99 份，检出阳性样品1 份，阳性样品检出率为1.01%，同比下降0.42 个百分点；2020 年检测样品125 份，检出阳性样品2 份，阳性样品检出率为1.60%，同比上升0.59个百分点。

(4)虾肝肠胞虫(EHP)检测。3年累计监测样品294 份，检出阳性样品56 份。2018 年检测样品70 份，检出阳性样品5 份，阳性样品检出率为7.14%；2019 年检测样品99 份，检出阳性样品14 份，阳性样品检出率为14.14%，同比上升7.00 个百分点；2020 年检测样品125 份，检出阳性样品37 份，阳性样品检出率为29.60%，同比上升15.46个百分点。

(5)虾虹彩病毒(SHIV)检测。两年累计检测样品224 份，检出阳性样品15 份。2019 年检测样品99 份，检出阳性样品4 份，阳性样品检出率为4.04%；2020 年检测样品125 份，检出阳性样品11 份，阳性样品检出率为8.80%，同比上升4.76个百分点。

三、结论

从南美白对虾苗种专项疫病监测结果看，阳性场检出率和阳性样品检出率均呈逐年上升趋势。从南美白对虾苗种专项疫病病原检测结果看，WSSV 和VpAHPND 阳性样品检出率相对较低，IHHN、EHP和SHIV阳性样品检出率相对较高。WSSV阳性样品检出率呈下降趋势，IHHN 和VpAHPND 阳性样品检出率均呈小幅波动趋势，EHP和SHIV阳性样品检出率均呈大幅上升趋势(图1)。

图1 疫病变化趋势

四、建议

从3年的监测情况看，常见疫病仍然存在，新发重大疾病不断出现，且发现同一份样品检出两种以上疫病病原的现象，严重影响南美白对虾养殖业的健康发展，应引起养殖者的高度重视。建议养殖者从以下几个方面做好疫病防控工作。

一是引进或选育SPF种虾、虾苗，从源头切断疫病的传播途径。二是重视南美白对虾苗种的产地检疫，力争做到“引苗必采、采样必检”。三是做好养殖环境和投入品的消杀工作，防止因环境消毒不彻底或投入品携带病原感染虾苗。四是对阳性场和阳性样品采取“隔离、扑杀、消毒、无害化处理”等措施，以控制病原扩散及避免疫情扩大，最大程度降低经济损失和养殖风险。