陈文利 黄新亮 刘 辉 周小楠 潘中武 董博翰 （皖南医学院生物化学教研室，芜湖241000）

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，我国乳腺癌的发病率居于世界首位［1-2］。在各种病理类型的乳腺癌中，三阴性乳腺癌侵袭性最强，且预后较其他类型较差，目前的治疗效果也不甚理想［3］。随着现代科学的不断进步，抗肿瘤免疫疗法已逐渐应用于各种癌症的治疗，并显示了较好的治疗效果［4］。其中肿瘤细胞裂解物（tumor cell lysate，TCL）是抗肿瘤免疫治疗中常用的免疫细胞激活物。TCL含有肿瘤细胞中的各种肿瘤抗原和免疫活化蛋白因子，可诱导抗肿瘤免疫的发生，从而治疗肿瘤［5］。但TCL在实际应用过程中也面临免疫激活能力不够强，甚至可能诱导免疫细胞凋亡的问题，这可能同TCL 中也存在免疫抑制物质有关［6］。程序性死亡因子1（programmed cell death protein 1，PD1)是公认的免疫检查点分子，其配体细胞程序性死亡配体1（pro‑grammed cell death protein ligand 1，PDL1）在多种癌症中高度表达，PD1 与PDL1 结合，可引发PIK3CA/AKT 等信号通路的抑制，传导负性调节信号，向下调节抗肿瘤、抗感染免疫，产生免疫逃逸促进肿瘤发生［7-11］。因此，TCL 对免疫细胞的活性产生的负面影响以及这种影响是否同PD1/PDL1 相互作用启动免疫检查机制有关值得探索。本研究将三阴性乳腺癌TCL 作用于T 淋巴细胞系H9，并用不同剂量的PD1/PDL1 抑制剂共同处理H9 细胞，以此探讨TCL本身以及抑制剂PDL1 与PD1 结合后对H9 细胞活性的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器 化学发光成像系统（中国Clinx）；流式细胞仪（贝克曼CytoFLEX）；酶标仪（美国Thermo）。

1.1.2 试剂 DMEM 培养液（美国Gibco）；胎牛血清（乌拉圭Lonsera）及双抗，辣根过氧化物酶偶联的山羊抗兔IgG 二抗（中国碧云天）；……