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木犀草素调控视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性的机制研究①

2022-02-13谢丹璇牟成金

中国免疫学杂志 2022年23期

谢丹璇 周 龑 牟成金 周 璞 林 萌

(四川省医学科学院,四川省人民医院东院眼科,成都610100)

视网膜母细胞瘤是婴幼儿时期最常见的眼内恶性肿瘤,约占儿童肿瘤的3%,其中1/3 的患儿为双眼发病,严重危害患儿的视力和生命安全[1]。视网膜母细胞瘤的具体病因尚不完全清楚,近年来,肿瘤干细胞理论为视网膜母细胞瘤的治疗提供了新思路,肿瘤干细胞是一类具有自我更新和分化能力的肿瘤细胞,其向周围组织侵袭的生物学行为是决定恶性肿瘤不良预后的主要因素[2-3]。木犀草素属于黄酮类化合物,研究证实其对多种恶性肿瘤有明显的抑制作用[4]。HAN 等[5]研究发现,木犀草素可通过上调FZD6抑制Wnt信号通路,从而抑制前列腺肿瘤干细胞特性。然而木犀草素对视网膜母细胞瘤干细胞的影响仍未见报道。本研究通过体外检测木犀草素对视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性的影响,进一步探究木犀草素发挥抗肿瘤作用的分子机制,为视网膜母细胞瘤的临床治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料 人源视网膜母细胞瘤细胞Y79、SORB50(美国ATCC 细胞库);木犀草素对照品(纯度>98%,成都瑞芬思生物科技有限公司);胎牛血清、PI3K抑制剂LY294002(美国Sigma-Aldrich);DMEM/F12培养基(美国Gibco);兔抗人血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体(美国Santa Cruz);兔抗人SOX2、OCT4、CD44 单克隆抗体(美国Cell Signaling Technology);兔抗人波形蛋白(Vimentin)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)、p-AKT、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及p-mTOR单克隆抗体(美国Abcam)。

1.2 方法

1.2.1 CCK8 法检测细胞活力 将生长状况良好的细胞以5×103个/ml 接种于……

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