周锐泽 李文亮 黄 鉴 保见坤 （昆明医科大学第一附属医院肿瘤外科，昆明650032）

手术、放疗及化疗是治疗大肠癌（colorectal can‑cer，CRC）的重要手段，转移和复发是导致CRC 预后不佳的重要原因［1］。免疫抑制是肿瘤细胞逃脱机体免疫系统监视的重要途径，肿瘤细胞分泌的TNF-α和可溶性白细胞介素-2 受体（soluble interleukin-2 receptor，sIL-2R）抑制细胞免疫，从而促进CRC 的增殖和转移［2］。微小RNA（microRNA，miRNA）是一种短的、不具备编码能力的单链RNA，miRNA 可靶向结合信使RNA（message RNA，mRNA）的3'端非翻译区域（3'-ntranslated region，3'-UTR）并抑制其翻译，近年来研究发现miRNA 在肿瘤的发生和发展中具有重要作用［3］。miR-152 是一种新发现的与肿瘤有关的miRNA，一项研究显示miR-152 在CRC 中水平降低，且低水平的miR-152预示不良预后，提示miR-152 在CRC 中具有抑癌作用，但其作用机制尚不清楚［4］。一项最新研究结果显示miR-152 可通过抑制Wnt 通路抑制子宫内膜上皮细胞增殖，但关于miR-152 与CRC 的关系仅通过了临床的相关性分析得到，而关于miR-152 对CRC 细胞生物学行为的影响和分子机制仍不清楚［5］。此外，最新研究显示Wnt也参与肿瘤的免疫抑制，结直肠癌细胞可通过Wnt/β-catenin 通路促进IL-17a 表达，从而抑制T 细胞的免疫能力，但Wnt/β-catenin 与CRC 免疫抑制的关系尚不明确，且miR-152 调控CRC 的机制是否与Wnt/β-catenin 通路有关也不清楚［6］。综上，本文主要分析miR-152调控Wnt通路对CRC 细胞生物学行为和免疫功能的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 人CRC 细胞系SW116（ATCC 公司，美国）；DMEM 培养基血清和抗体、LipofectamineTM2000（Invitrogen公司，美国）；miR-152类似物（mimic）和抑制剂（inhibitor）以及相应的阴性对照（negative control，NC，GenePharma 公司，中国）；miRNeasy Mini试剂盒；TaqMan miRNA 试剂盒、ECL 显色试剂盒（Thermo Fisher 公司，美国）；MiScript SYBR Green PCR 试剂盒（TaKaRa 公司，日本）；CCK-8 试剂盒和结晶紫染色试剂盒（Beyotime 生物技术研究所，中国）；……