5%烯效唑可湿性粉剂高效液相色谱分析方法研究

2022-02-06张保建贾玉珠赵广义杨光鑫石凯威

农药科学与管理 2022年11期

宋朋，张保建，王建，贾玉珠，赵广义，杨光鑫，石凯威

(1.山东威瑞信试验检测有限公司，山东济南 250119；2.农业农村部农药检定所，北京 100125)

1 前言

烯效唑英文名称：Uniconazole，CAS号：83657-22-1，分子式：C15H18CIN3O，化学名称：(E)-(RS)-1-(4-氯苯基)-4，4-二甲基-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)戊-1-烯-3-醇。烯效唑是一种广谱性唑类植物生长调节剂，对草本或木本的单子叶或双子叶作物具有强烈的抑制生长作用。具有矮化植株、防止倒伏、提高绿叶素含量的作用。烯效唑具有用量小、活性强，且不会使植株畸形，持效期长，对人畜安全的优点，可用于水稻、小麦、玉米、花生、大豆、棉花、果树、花卉等作物。烯效唑还具有高效、广谱、内吸的杀菌作用，对稻瘟病、小麦根腐病、玉米小斑病、水稻恶苗病、小麦赤霉病、菜豆炭疽病显示良好的抑菌作用。

目前国内有关烯效唑可湿性粉剂的分析方法未见公开报道。本文采用高效液相色谱法对5%烯效唑可湿性粉剂进行定量分析，该方法操作简便快捷，分离效果好，精密度和准确度均能达到定量分析的要求。

2 试验部分

2.1 试剂和溶液甲醇(色谱纯)；超纯水(电阻率18.2MΩ·cm，25℃)；烯效唑标样，已知质量分数99.3% ；5%烯效唑可湿性粉剂。

2.2 仪器高效液相色谱仪：日立Primaide，具有二极管阵列检测器和自动进样器；日立色谱工作站；色谱柱：250mm×4.6mm(i.d.)不锈钢柱，内装ZORBAX SB-C18、5μm填充物。

2.3 液相色谱操作条件流动相：ψ(甲醇：水)=75+25(V/V)；流量：1.0mL/min；柱温：30±2℃；检测波长：254nm；进样体积：10μL；保留时间：烯效唑约7.5min。典型的烯效唑标样和5%烯效唑可湿性粉剂的高效液相色谱图(图1、2)。

图1 烯效唑标样高效液相色谱图

图2 5%烯效唑可湿性粉剂高效液相色谱图

2.4 测定步骤

2.4.1 标样溶液的配制称取0.05g烯效唑标样(精确至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL甲醇，超声波振荡5min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。

2.4.2 试样溶液的配制称取含烯效唑0.05g的试样(精确至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL甲醇，超声波振荡5min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤。

2.4.3 测定在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针标样溶液的响应值相对变化<1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

2.4.4 计算将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中烯效唑峰面积分别进行平均。试样中烯效唑的质量分数ω(%)，按式(1)计算：

(1)

式中：

A1──标样溶液中烯效唑峰面积的平均值；

A2──试样溶液中烯效唑峰面积的平均值；

m1──标样的质量，g；

m2──试样的质量，g；

P──标样中烯效唑的质量分数，%。

3 结果与讨论

3.1 色谱条件的选择通过日立Primaide高效液相色谱仪的光谱数据采集功能，获得烯效唑的紫外波长扫描图(图3)。从图中可以看到烯效唑最大吸收波长在254nm处，在该波长处灵敏度较高，干扰较少，能够满足分析的要求，故将检测波长确定为254 nm。

图3 烯效唑的紫外光谱图

色谱柱选择250mm×4.6mm(i.d.)ZORBAX SB-C18、5um的不锈钢柱。根据烯效唑物化性质和溶剂的紫外吸收波长，选择甲醇作为溶剂溶解样品，并以甲醇和水作为流动相。将流动相按不同比例在色谱柱上进行试验，随着甲醇比例的增加，保留时间减小，当甲醇与水比例达到80： 20时，有杂质峰干扰烯效唑，峰纯度达不到试验要求，最终选择Ψ(甲醇：水)=75： 25作为流动相，流速1.0mL/min。该条件下，烯效唑色谱峰峰形较好，与杂质能完全分离，具有良好的精密度和准确度，并且分析时间较短，提高了工作效率。

3.2 分析方法的特异性试验将2.4.1、2.4.2配制的烯效唑标样溶液和试样溶液，在上述色谱操作条件下进行全波段扫描、峰纯度分析。结果表明标样溶液和试样溶液中烯效唑峰纯度均>990，有效成分出峰处无其他物质干扰，符合定量分析要求。

3.3 分析方法的线性相关性试验称取0.05g烯效唑标样(精确至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL甲醇，超声波振荡5min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀。用移液管移取3、4、5、6、7mL上述溶液，分别置于50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配置成5个不同浓度的标准溶液。在上述色谱操作条件下进行分析，以烯效唑质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线(图4)，得到烯效唑线性回归方程为y=12 8446x-76 083，线性相关系数为0.999 5。