焦健，夏炎，武雪莉，王苗苗，宋春晖，庞宏光，白团辉，宋尚伟，黄松,2，郑先波

(1.河南农业大学园艺学院，河南 郑州，450002； 2.信阳农林学院，河南 信阳，464006)

苹果(Malusdomestica)是中国种植面积最大，产量最高的果树树种之一，具有较高的经济价值[1-2]，但苹果生长中很容易发生由病毒和类病毒引起的病害[3]。目前世界上报道的苹果病毒病有39种，包括非潜隐性病毒25种，潜隐性病毒14种[4-5]，其中苹果坏死花叶病毒(apple mosaic virus，ApNMV)、苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus，ACLSV)、苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus，ASPV)、苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus，ASGV)、苹果锈果类病毒(apple scar skin viroid，ASSVd)在中国发生较为普遍[6]。苹果病毒病已成为制约苹果产业健康发展的重要生物因素，病毒侵入树体后会在树体内迅速增殖，使其终生带毒，不仅影响果树正常的生理代谢和生长，而且会导致果实品质和产量的下降[7]。

苹果树主要通过无性繁殖，树体一旦感病，将终生带毒[8]，因此要想尽可能降低、避免病毒病造成的损失，只能通过繁殖无病毒种植材料以及在植物生长阶段的早期进行病毒检测并及时处理感病植株，以避免产量的损失，防止病毒病的进一步传播[9]。因此，特异性强、灵敏度高、准确快速的苹果病毒检测体系十分重要。随着分子病毒学和生物技术的进步，如今有许多方法已应用于植物病毒的检测：指示植物法、酶联免疫法、电镜观测法、核酸分子杂交法[10-13]、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)和新一代测序技术(next generation sequencing，NGS)[14-16]，但大多数分子检测方法都存在操作复杂、设备要求高、检测时间过长等缺陷。

重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification，RPA)是一种新型的等温核酸扩增和检测技术，由英国TwistDx Inc公司于2006年成功开发[17]。……