董小敬，王剑桥，秦文皓，杜雪地

(扬州大学动物科学与技术学院，江苏 扬州225009)

甜菜碱是一种生物碱，首先在甜菜中发现，后被证明广泛存在于动植物及微生物体内。畜禽动物中的应用研究表明，甜菜碱具有良好的诱食效果，而且还能够参与调节动物机体蛋白质和脂肪代谢过程，促进动物生长以及改善肉质。研究表明，甜菜碱在水产动物中也具有良好的诱食效果，且有利于改善高脂饲料导致的脂肪异常沉积问题。笔者前期研究发现，甜菜碱降低异育银鲫脂肪沉积可能与调控生脂基因表达有关。

异育银鲫是我国重要的淡水养殖品种，不仅具有肉质细嫩、味道鲜美等特点，而且生长速度快、食性广泛、容易饲养。本试验通过考察异育银鲫血清和肝胰脏生化指标，探讨饲料中甜菜碱的添加量对异育银鲫的影响，旨在为异育银鲫健康养殖和防止脂肪异常沉积研究提供理论依据。

一、材料与方法

1.试验饲料

制备不同甜菜碱添加水平的4组试验饲料(粗蛋白质水平37%左右、粗脂肪5%左右)，甜菜碱添加量分别为0%(对照组)、0.08%、0.4%和2%。甜菜碱购于索莱宝科技有限公司，纯度大于98%。试验饲料配方及营养水平见表1。所有饲料原料经过精磨、称重后混匀，制作成粒径1.5毫米颗粒饲料，55℃烘干后晾至室温，于4℃冰箱中保存备用。

表1 实验饲料配方及主要营养指标%

2.饲养管理与取样

异育银鲫购自江都渌阳湖水产养殖场，暂养1周后，挑选规格均匀、体质健壮的幼鱼，个体重(9.79±0.51)克，随机分为4组，每组设3个重复，每个重复放养30尾鱼。试验鱼饲养在直径为80厘米、高为120厘米的圆桶中，采用微循环换水，连续增氧。试验周期为10周。养殖试验结束后，对试验鱼进行24小时饥饿处理，进而进行麻醉和取样。取样时，每个桶随机选择3尾鱼，取肝胰脏在液氮中速冻后于-80℃下保存待用。另外选择3尾鱼，取尾静脉血，4℃条件下离心10分钟，取上层血清于-80℃下保存待用。

3.血清与肝胰脏生化成分分析

血清生化指标使用贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析仪进行分析。碱性磷酸酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、超氧化物歧化酶活性和极低密度脂蛋白含量使用南京建成生物工程研究所的试剂盒进行测定，操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。

4.数据统计与分析

将记录的试验数据输进Excel表中进行整理，使用SPSS 16.0进行数据统计，单因素方差分析(ANOVA)达到显著水平后(P＜0.05)，再采用Tukey’s检验进行多重比较。数据表示为“平均值±标准误”。

二、结果与分析

1.血清生化指标(表2)

表2 投饲甜菜碱对异育银鲫血清生化指标的影响

由表2可见，随着甜菜碱添加水平升高，异育银鲫血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白含量先上升、后降低，在0.4%甜菜碱添加组达到最高。其中，0.4%组甘油三酯和低密度脂蛋白含量显著高于其他组(P＜0.05)，总胆固醇含量显著高于对照组和0.08%组(P＜0.05)，高密度脂蛋白含量显著高于对照组(P＜0.05)。当甜菜碱添加量为2%时，血清乳酸脱氢酶含量显著高于其他各组(P＜0.05)，其含量几乎达到其他组的1.5倍。随着甜菜碱添加量增高，谷丙转氨酶、总蛋白质和血清白蛋白含量先降低、后升高，而谷草转氨酶升高、碱性磷酸酶活性降低。球蛋白含量在各组间波动，各组间差异不显著(P＞0.05)。

2.肝胰脏生化指标(表3)

表3 投饲甜菜碱对异育银鲫肝胰脏生化指标的影响

由表3可见，随着甜菜碱添加水平升高，异育银鲫肝胰脏超氧化物歧化酶(SOD)活性先降低、后升高，且0.4%组SOD活性显著低于2%组(P＜0.05)。但肝胰脏碱性磷酸酶(ALT)活性和极低密度脂蛋白(VLDL)含量随甜菜碱添加量增加先升高、后降低，其中0.08%组碱性磷酸酶活性显著高于其他各组(P＜0.05)，极低密度脂蛋白含量在0.08%组和对照组之间存在显著差异(P＜0.05)。0.08%组肝胰脏谷草转氨酶活性最低，且显著低于0.4%组(P＜0.05)，但与另外两组间无显著性差异(P＞0.05)。谷丙转氨酶(AST)活性稳定，各组间无显著性差异(P＞0.05)。

三、讨论

在植物油和高脂饲料被广泛应用的水产养殖大环境下，脂肪异常沉积已成为制约产业健康发展的重要因素。甜菜碱作为甲基供体可在脂肪代谢中发挥重要作用，有助于防止脂肪肝的发生。笔者前期的研究表明，适量的甜菜碱添加水平(0.4%)能显著降低异育银鲫全鱼、肌肉和肝胰脏中的脂肪含量，而较低和过高的添加水平均无此效果，表明适量添加甜菜碱有利于改善高脂饲料带来的脂肪异常沉积问题。

本研究进一步探讨了甜菜碱不同添加水平对异育银鲫血清和肝胰脏生化指标的影响，发现血清生化指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶活性均未受影响，但高水平甜菜碱添加(2%)导致血清乳酸脱氢酶显著升高。相比之下，0.4%的甜菜碱添加导致血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量均显著上升。此外，适量添加甜菜碱也导致肝胰脏极低密度脂蛋白含量显著升高。结合适量添加甜菜碱可显著降低异育银鲫肝胰脏粗脂肪含量，笔者推测向饲料中添加适量甜菜碱有利于促进脂肪从肝胰脏向外转运。