何锡忠，林 鸷，赵本进，朱永军，彭丽英

（1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海 201106；2.上海佳牧生物制品有限公司，上海 201106）

细胞悬浮培养技术按照细胞的贴壁性质可分为悬浮细胞培养和贴壁细胞微载体悬浮培养[1]。微载体培养系统不适合在普通摇瓶中进行，且存在微载体价格昂贵、重复利用效果差、细胞制备需求量过大等缺点。全悬浮细胞培养具有细胞密度大、放大倍数大、传代方便等优势，但对各种培养条件也有较高要求。无血清培养是用已知的人源或者动物源蛋白或生长因子、激素来代替动物血清的一种培养方式，可降低后期纯化工作难度，提高产品质量[2]。驯化一株可适应普通摇瓶的全悬浮细胞可推进细胞培养工艺的进一步升级。全悬浮细胞驯化技术已在一些细胞中得到广泛应用。阿尔祖古丽·阿依丁等[3]对Marc-145 P50 代细胞进行无血清悬浮培养48 h 后，发现细胞密度可达到4.14×106cells/mL；刘天伦等[4]使用3 种培养方法驯化，将PK15 细胞从复苏到最终驯化成全悬浮细胞，传代23 个代次，发现细胞状态良好；王嘉琪等[5]通过梯次降低血清添加量，逐步多代次适应，使ST 细胞由贴壁转为悬浮，并能在无血清培养基中稳定传代，在反应器中高密度悬浮生长。本研究对一株贴壁ST 细胞在只通过1 个低血清滴度添加量适应培养后，进行无血清全悬浮驯化，并对猪伪狂犬病毒（PRV）在ST 悬浮细胞上的敏感性进行分析，以期为大规模培养PRV、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒和猪瘟病毒等提供试验依据。……