余婷玉， 蔡 爽， 高运苓， 李 静*,3

(1.湖北文理学院附属医院，襄阳市中心医院中心实验室，湖北襄阳 441021；2.湖北文理学院食品科学技术学院·化学工程学院，湖北襄阳 441053；3.湖北文理学院附属医院，襄阳市中心医院，白癜风特色制剂襄阳市重点实验室，湖北襄阳 441021)

反相色谱(Reversed-Phase Liquid Chromatography，RPLC)的分离效率高、分析对象覆盖范围广，且可与多种检测器兼容，在日趋多样化的色谱分离模式中仍占据主流地位。其中，疏水性长链烷基键合硅胶是目前应用最广泛的反相色谱固定相[1,2]。硅胶基质具有机械强度高、化学性质稳定、粒径及孔径可控、易于表面化学修饰等诸多优势，但也存在一定的缺陷：(1)在进行键合相修饰前，通常会采用酸或热处理对硅胶进行再次羟基化以增加硅羟基的数量、提高功能基的键合率[3]。然而，约有50%的硅羟基由于空间位阻无法参与键合反应，以形成氢键的结合状态或游离状态残留，其中游离的硅羟基呈现较强的酸性，在色谱分析中易与碱性化合物以及富含-COOH、-NH2等亲水性基团的多肽或蛋白质等大分子物质产生较强的相互作用，造成峰拖尾甚至发生不可逆吸附，大大降低分离度与灵敏度[4]；(2)长链烷基键合硅胶在高比例水相的流动相中易出现疏水塌陷，RPLC中最常用的C18色谱柱尤为明显，因而对于极性物质的分离能力十分有限[5]。

为改善上述缺陷，色谱学者们提出了极性修饰的反相色谱固定相[6]。在硅胶与疏水烷基长链之间插入酰胺基、脲基、磺酰胺基等极性基团，称为极性嵌入，合成过程通常需要分两步进行，但由于空间位阻影响，第二步反应产率有限，最终得到的固定相表面基团不均匀，且残余的活性极性基团会降低烷基的疏水分离性能；……