李佳园，魏晓嘉，万国慧，杨 雪，于佳禾，刘金凤，金重先，王雨青，吕 研，石晋丽

基于Nrf2/D1R-ERK信号通路探讨甘松对左旋多巴诱导的异动症大鼠的作用机制

李佳园，魏晓嘉，万国慧，杨 雪，于佳禾，刘金凤，金重先，王雨青，吕 研，石晋丽*

北京中医药大学中药学院，北京 102488

基于Nrf2/D1R-ERK信号通路探讨甘松对左旋多巴（levodopa，-DOPA）诱导的异动症（levodopa-induced dyskinesia，LID）模型大鼠的作用机制。将SD大鼠随机分为假手术组、帕金森（Parkinson’s disease，PD）组、-DOPA组和甘松＋-DOPA组。PD组、-DOPA组和甘松＋-DOPA组颈背部sc鱼藤酮葵花籽油（1.5 mg/kg）14 d制备PD模型，假手术组sc等体积葵花籽油，之后进行14 d的药物干预：DOPA组ig-DOPA（100 mg/kg）和苄丝肼（25 mg/kg），甘松＋-DOPA组ig甘松（1240 mg/kg）、-DOPA（100 mg/kg）和苄丝肼（25 mg/kg），假手术组和PD组ig等体积0.9%氯化钠溶液。通过前肢功能检测实验评估-DOPA对PD大鼠运动能力的影响；通过异常不自主运动（abnormal involuntary movement，AIM）评分评估-DOPA导致LID大鼠的AIM程度；采用免疫组化法考察大鼠黑质中酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）的表达；Western blotting法检测大鼠纹状体内转录因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2 related factor 2，Nrf2）、多巴胺D1受体（dopamine D1 receptor，D1R）、细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）、磷酸化ERK（（phosphorylated ERK，p-ERK）和∆FosB蛋白的表达；ELISA法检测大鼠脑纹状体中活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）、血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、多巴胺和cAMP调节的磷蛋白-32（dopamine and adenosine 3′,5′-monophosphate-regulated phospho-protein，DARPP-32）和p-DARPP-32的含量。前肢功能检测结果显示，-DOPA单用和甘松与-DOPA联用均能显著增加PD大鼠的前肢跨步次数（＜0.001）。AIM评分结果显示，与-DOPA单用相比，甘松与L-DOPA联用可显著降低LID大鼠的AIM症状（＜0.01）。免疫组化结果显示，PD组和-DOPA组的TH表达没有显著性差异，而甘松与-DOPA联用可明显增强PD大鼠的TH表达（＜0.05），同时显著增强-DOPA单用导致的LID大鼠的TH表达（＜0.01）。Nrf2信号通路结果显示，PD组和-DOPA组没有显著性差异，而甘松与-DOPA联用可明显降低PD大鼠的ROS含量（＜0.05），显著促进Nrf2表达（＜0.01），并显著提高HO-1、SOD、GSH-Px的含量（＜0.001）；……