平大冰，孙 鑫，彭 渊，胡旭东，陶艳艳，刘成海,3*

(1.上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所，上海 201203；2.上海中医药大学基础医学院生物教研室，上海 201203；3.上海市中医临床重点实验室，上海 201203)

自然杀伤细胞(natural killer cells，NK cells)是先天免疫系统重要的免疫细胞，是人体抵抗癌细胞和病毒感染的第一道防线，充当免疫反应的调节剂[1]。NK细胞具有很强的免疫调节功能，可以通过直接杀伤肝星状细胞而具有抗纤维化活性[2]。扶正化瘀方(制剂为胶囊或片剂)由丹参、桃仁、虫草菌丝、松黄、五味子、绞股蓝组成，是上海中医药大学肝病研究所研制的抗肝纤维化中药新药(Z20020073)，目前广泛应用于临床治疗肝纤维化和肝硬化，研究发现其可能通过调节机体免疫微环境发挥抗肝纤维化作用[3]，但其对NK细胞的影响尚不明确。本研究拟通过人外周血NK细胞系NK92细胞，探讨扶正化瘀方对NK细胞的活化和杀伤功能影响，为进一步研究扶正化瘀方对机体免疫微环境调节提供依据。

1 材料

1.1 细胞 人外周血NK细胞NK92(ATCC®CRL-2407TM)，悬浮生长，购自美国ATCC细胞库。NK92细胞在Tank细胞无血清培养基中培养。人慢性髓系白血病细胞K562(3131C0001000700029)，悬浮生长，在自然杀伤分析中广泛作为高敏感的体外受体，购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心，K562细胞在含有10%FBS的IMDM培养基中培养。所有细胞均培养在37 ℃、5%CO2环境中。

1.2 药物 聚肌胞苷酸(Poly I:C，货号P9582)，购自美国Sigma公司，批号118M4035V。扶正化瘀方浸膏粉，批号180206，由上海黄海制药有限责任公司提供，每24 g全方中丹参以丹酚酸B计不低于15.6 mg/批，以丹参素钠计不低于13.2 mg/批，虫草菌丝以腺苷计不少于4.8 mg/批，五味子以五味子乙素计不少于2.28 mg/批。……