氨基酸衍生物的非水毛细管电泳分离研究
2021-12-20谢银凤石瑞卿
广州化工 2021年23期
谢银凤,石瑞卿,张 辉
(1 山东省潍坊生态环境监测中心,山东 潍坊 261041;2 北京华企动力信息技术有限公司,北京 100089)
氨基酸是构成蛋白质的基本单元,在生命有机体新陈代谢的过程中起着关键作用,研究其分离分析在食品科学、生物化学和临床医学等领域有着十分重要的意义[1-3]。大多数氨基酸本身没有天然的紫外或荧光吸收,为拓展其检测的技术手段,提高其分离选择性和分析灵敏度,经常需要对氨基酸进行柱前衍生。目前,氨基酸的分离分析研究通常采用气相色谱法和高效液相色谱法进行[4-6]。
非水毛细管电泳 (NACE),作为毛细管电泳一个相对较新的分支,近年来备受分析工作者的青睐[11-14]。与水介质毛细管电泳相比,非水毛细管电泳有以下优越性:允许使用大孔径的毛细管柱进行分离分析;体系较低的电流允许使用高电压以缩短分离时间;增大疏水物质溶解度,减少毛细管壁对其的吸附,有效降低焦耳热。董玉明等以4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑 (NBD-Cl) 为柱前衍生试剂,采用激光诱导荧光检测器实现了丙氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸和缬氨酸四种氨基酸的非水毛细管电泳分离[7]。本文采用2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑)-乙氧基]-乙基氯甲酸酯 (DBCEC-Cl)[8]作为氨基酸衍生化试剂,首次实现了15种氨基酸衍生物的非水毛细管电泳分离,结果满意。
1 实 验
1.1 仪器与试剂
HP-3D毛细管电泳仪,美国 Agilent公司(毛细管总长58.5 cm,有效长度50 cm,内径50 μm)。
氨基酸,美国 Sigma公司;甲酰胺(分析纯),天津市广成化学试剂有限公司;乙腈(色谱纯),山东禹王集团化工厂;……
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