尹君 王少飞 张俊杰 谢佳谌 陈宏宇贾源 胡徐锦 于凌尧2)

1) (桂林电子科技大学电子工程与自动化学院,光子学中心,桂林 541004)

2) (桂林电子科技大学,广西自动检测技术与仪器重点实验室,桂林 541004)

为获取生物组织和活体细胞内部精细结构,要求显微成像技术具备层析成像能力.基于动态散斑照明的宽场荧光显微技术利用动态变化的散斑图案全场照明待测样品,通过提取焦平面内变化剧烈的荧光信号,获得三维结构的荧光层析图像.本文通过理论分析和模拟仿真,研究了这一荧光显微技术获取荧光层析图像的过程.模拟仿真了影响荧光层析图像成像质量的主要因素,CCD 记录的原始荧光图像数量和散射体颗粒度与成像质量的关系.模拟仿真结果表明,荧光层析图像的成像质量随原始荧光图像数量的增加先提高后趋向饱和,随散射体颗粒度的增大先增大后降低.综合考虑成像质量和成像时间等因素,当用于提取荧光层析图像的原始荧光图像的数量为60 幅,散射体颗粒度为1000 左右时,可获得图像对比度高于85%的高空间分辨率荧光层析图像.理论分析和模拟仿真研究工作为基于动态散斑照明的宽场荧光显微技术的系统结构设计、实现和优化提供了理论基础和指导.

1 引言

近年来,随着激光、荧光标记、微弱信号探测、图像处理和计算机等技术的飞速发展,激光扫描共焦荧光显微技术(laser scanning confocal fluorescence microscopy,LSCM)已成为快速获取生物组织和活体细胞内……