茅荣鑫 胡庆 刘展菱 刘开玲 黄琬茶 张浦 刘秋萍

【摘要】目的 探讨带状疱疹（HZ）患者T淋巴细胞亚群变化及其与Fas、Fasl表达的相关性。方法 选取2018年6月～2018年12月本院收治的HZ患者40例，采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群及淋巴细胞Fas、Fasl表达水平，选取40例健康体检者作为对照组。结果 HZ患者外周血CD8+表达水平（31.11±5.72 %）显著高于对照组（26.38±4.71 %），CD4+、CD4+/CD8+表达水平（29.85±3.88%，0.96±0.51）显著低于对照组（35.62±5.58%，1.26±0.98），差异有统计学意义（P<0.05）。相比对照组，HZ患者外周CD4+T淋巴细胞Fas、Fasl表达水平显著降低，CD8+T淋巴细胞Fas、Fasl表达水平显著增高，差异有统计学意义（P<0.05）。HZ患者外周血CD8+表达与CD8+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关（P<0.05），CD4+表达与CD4+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关（P<0.05）。结论 HZ患者存在T淋巴细胞亚群异常改变，并且可能与Fas/Fasl介导的淋巴细胞凋亡功能紊乱有关。

【关键词】带状疱疹;T淋巴细胞亚群;Fas;Fasl

【中图分类号】R2-06【文献标识码】A 【文章编号】2026-5328（2021）10-006-03

带状疱疹（HZ）是由水痘-带状疱疹病毒（VZV）感染所致，多见于老年人及免疫功能低下者，其所致疼痛严重影响患者生活质量[1]。目前，HZ的治疗仍无特效手段，临床疗效不理想，主要原因在于其病理机制未得到完全阐明。研究发现[2]，T淋巴细胞亚群异常与HZ的发病密切相关，在受到VZV感染时，HZ患者体内T淋巴细胞凋亡增多，使得由T淋巴细胞亚群介导的细胞免疫功能降低。Fas/FasL系统是体内介导细胞凋亡的一对糖蛋白分子，在机体免疫功能调节上有着重要作用，其表达异常被发现与多种免疫性疾病的发生发展具有关联性[3-4]。但目前关于带状疱疹患者Fas/Fasl表达水平的报道尚少见，尤其是其与T淋巴细胞亚群异常的相关性不明确。为此，本研究旨在观察带状疱疹患者T淋巴细胞亚群及Fas、Fasl的表达情况，并探讨二者的相关性。

1 对象与方法

1.1研究对象

选取2018年6月～2018年12月本院收治的HZ患者。纳入标准：（1）均经症状、体征诊断为HZ;（2）急性期，病程不超过7d;（3）未经相关治疗。排除标准：（1）合并严重心、肺等系统性疾病者;（2）合并自身免疫性疾病者;（3）伴严重中枢神经系统并发症;（4）恶性肿瘤患者;（5）其他急慢性感染者;（6）孕妇或哺乳期妇女;（7）合并其他可能影响免疫功能的疾病者。共入组40例，其中男18例，女22例，年龄37～66（52.73±6.83）岁，皮疹部位：头面6例，四肢13例，躯干21例。另选取同期性别、年龄相匹配的健康体检者40例作为对照组，其中男20例，女20例，年龄39～67（53.58±6.71）岁，均排除合并急慢性感染、自身免疫系统疾病等。两组性别、年龄比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究获得本院伦理审批通过，受试者均签署知情同意书。

1.2研究方法

1.2.1标本采集

HZ组于就诊当天、未采取相关治疗措施之前，采集早晨空腹周静脉血5ml，用肝素钠抗凝，-80℃环境下保存待检。对照组于健康体检时采集标本。

1.2.2外周血T淋巴细胞亚群表达的检测

采用美国BD公司FACS Calibur流式细胞仪进行外周血T淋巴细胞的检测，检测方法参照文献[5]中方法。

1.2.3外周血淋巴细胞Fas、Fasl表达的检测

取2支EP试管A、B;A中加入CD4+、IgG-FITC各10uL;B中加入CD4+、Fas-FITC个10uL;加100uL悬液（细胞浓度为1×106/ml）于A、B中;室温下避光30min;用1ml PBS洗2次，离心1500r/min 5min;加1%多聚甲醛500uL上机分析 ，上机前先用标准荧光微球对流式细胞仪进行调试，以使各通道变异系数稳定在2%以内，记录CD4+淋巴细胞上Fas的表达情况;同法检测FasL及CD8+淋巴细胞Fas、Fasl表达情况。

1.3统计学方法

应用SPSS24.0进行统计分析。计数资料比较用x2检验计量资料（正态分布）采取（）形式表示，用独立样本t检验进行组间对比;变量之间的相关性分析采用Pearson相关分析;以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HZ患者外周血T淋巴细胞亚群表达

相比对照组，HZ患者外周血CD8+显著增高，CD4+及CD4+/CD8+显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 HZ患者外周血淋巴细胞Fas、Fasl表达情况

相比对照组，HZ患者外周CD4+T淋巴细胞Fas、Fasl表达水平显著降低，CD8+T淋巴细胞Fas、Fasl表達水平显著增高，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3 HZ患者外周血T淋巴细胞亚群表达与Fas、Fasl表达的相关性

HZ患者外周血CD8+表达与CD8+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关（P<0.05），CD4+表达与CD4+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关（P<0.05）。见表3。

3 讨论

研究证实[6]，HZ的发生发展与机体免疫功能低下紧密关联，而T细胞介导的细胞免疫在其中发挥着关键作用。在HZ病毒感染过程中，CD4+T细胞的耗竭可致使病毒载量增高。本研究显示，HZ组外周血CD8+表达显著增高，CD4+及CD4+/CD8+表达显著降低，差异有统计学意义，这与既往报道[7]一致，说明HZ患者存在细胞免疫功能低下，表现为CD8+表达增高，CD4+/CD8+比例增高。但带状疱疹患者的T淋巴细胞亚群的变化是通过何种机制实现的，目前尚不完全清晰。深入阐述HZ患者T淋巴细胞亚群失衡机制对于临床防治有着重要意义。

细胞凋亡，是指由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡是一个主动过程，涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的过程。研究表明[8]，细胞凋亡与免疫性疾病、病毒感染等有着紧密关联，作为细胞数量减少的关键起始程序，其能够通过调节T淋巴细胞亚群变化，而影响机体的免疫系统。Fas/FasL系统是体内介导细胞凋亡的一对糖蛋白分子，在免疫系统中发挥重要的作用。生理状况下，Fas抗原可广泛表达于胸腺细胞活化的T 淋巴细胞等免疫细胞表面。在很多免疫相关疾病如系统性红斑狼疮[9]、慢性光化性皮炎[10]中，已发现Fas/FasL与外周血T淋巴细胞亚群失衡有关。但目前关于HZ患者T淋巴细胞亚群失衡与Fas/FasL之间的关系尚无相关报道。本研究显示，HZ患者外周血淋巴细胞Fas、Fasl表达水平显著低于对照组，且外周血CD8+表达与CD8+淋巴细胞上的Fas、Fasl表达均呈负相关，CD4+表达与CD4+淋巴细胞上的Fas/Fasl表达均呈负相关，提示HZ患者Fas/Fasl表达异常，并可推测其可能参与了T淋巴细胞亚群失衡过程;外周血CD4+T细胞上Fas、Fasl表达增高，可引起CD4+T细胞凋亡增加，而Fas/Fasl介导的CD8+T细胞的凋亡功能可能受到抑制，即CD8+T细胞的增殖是增加的。本课题前期研究也发现，HZ患者存在T淋巴细胞亚群失衡，并且可能与Bcl-2调控的细胞凋亡有关[11]。这对于阐述HZ病理机制和指导临床治疗有着重要意义。

综上，本研究表明，HZ患者外周血存在T淋巴细胞亚群失衡，表现为CD8+表达降低，CD4+和CD4+/CD8+增高;Fas、Fasl异常表达诱导淋巴细胞凋亡功能紊乱可能是导致T淋巴细胞失衡的重要机制;这有助于阐述HZ的病理机制，对临床诊治有重要指导意义。

【参考文献】

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[11]茅荣鑫，胡庆，刘展菱，等. 带状疱疹T淋巴细胞亚群变化及其与Bcl-2表达的关系[J]. 世界最新医学信息文摘（电子版），2020，20（1）：159-160.

基金项目：广西壮族自治区卫生和计划生育委员会自筹经费科研课题，Z20180399

第一作者简介：茅荣鑫（1974-），男，本科，副主任医师，主要研究方向为中西医结合治疗常见病的临床研究。

通讯作者：胡庆（1990-），男，硕士研究生，医师，主要研究方向为中西医结合治疗常见病的临床研究。