张广萍 任德帅 陈团团 姜岩 杜姝

【摘 要】目的：探讨HIF-1α/miR-128-3p和AXIN1在海马神经元凋亡中的作用，旨在阐明缺氧诱导因子miR-128-3p轴在MPTP所致PD小鼠海马神经变性中的作用。方法：通过腹腔注射MPTP进行PD小鼠模型的建立，利用RT-PCR技术、Western Bolt和TUNEL染色检测小鼠海马脑组织HIF-1α/miR-128-3p、AXIN1表达与凋亡。结果：AXIN1在PD小鼠模型中高表达，而HIF-1α呈低表达；HIF-1α/miR-128-3p过表达可以使Axin1下调，而Wnt/β-catenin蛋白表达升高。结论：HIF-1α/miR-128-3p轴上调可通过抑制Axin1和激活Wnt/β-catenin信号通路抑制MPTP损伤小鼠海马神经元凋亡。

【关键词】帕金森；miR-128-3p；AXIN1；Wnt/β-catenin；凋亡

帕金森病（Parkinsons disease，PD）是一种常见而复杂的神经退行性疾病，主要以静止震颤、肌肉强直以及运动迟缓等为主，其发病与氧化应激、氧气葡萄糖供应不足以及黑质致密区多巴胺神经元进行性丢失有关[1]。PD的病因尚未完全阐明，以中枢神经系统不同部位变性为主，尚有其他临床特点，如进行性核上性麻痹（PSP）、纹状体黑质变性（SND）、ShyDrager综合征（SDS）及橄榄脑桥小脑萎缩（OPCA）等[2]。miRNAs可以通过调节PD小鼠模型中黑质多巴胺能神经元来影响PD的进展。本研究探讨HIF-1α、miR-128-3p和AXIN1在海马神经元凋亡中的作用，旨在阐明缺氧诱导因子HIF-1α/microRNA-128-3p（miR-128-3p）轴在MPTP所致PD小鼠海马神经变性中的作用，为临床上治疗PD提供理论依据。

1 实验方法

1.1 构建模型与转染

取健康雄性C57BL/6小鼠腹腔注射稀释后的MPTP溶液，按每千克30mg/次/天，连续进行5d。如果出现倦怠、烦躁、震颤、运动迟缓等形态特征表明PD模型构建成功。将小鼠随机分为正常对照组、PD模型组、HIF-1α/miR-128-3p组、AXIN1组，收集小鼠血清以及脑组织进行细胞转染，然后进行各项指标检测。

1.2 RT-PCR技术

采用TRIZOL试剂盒进行提取组织或细胞总RNA，并检测浓度，按照反转录试剂盒将总RNA反转录成cDNA，设置条件为：95℃预变性4 min；……