刘超，张焱祥，王显勋，李勇光

(江汉大学附属湖北省第三人民医院 骨科,湖北 武汉 430000)

近年来，各种骨折的发生率明显增加，其中肢体骨折是骨折的主要类型[1]。骨折的治疗包括手术治疗和非手术治疗,为了获得更好的治疗效果，临床上通常采用外固定、切除内固定、髓内钉固定等方法[2]，但术后骨的发育和生长也是康复的重要因素。骨的发育和形成主要通过软骨内成骨和膜内成骨，而肢体骨的发育和形成主要通过软骨内成骨[3]，既往研究发现软骨内成骨过程与各种内分泌激素及相关生长因子的调控有关，这些内分泌激素及相关生长因子通过复杂的相互作用和一系列正、负反馈来调控骨骼的发生和生长[4]。印度刺猬蛋白(Ihh)是Hedgehog家族成员之一，在所有生物系统中都能检测到其表达，在生物发育过程中起着复杂而重要的作用，是临床调节软骨细胞分化和增殖的信号因子[5]。本研究旨在分析Ihh基因敲除对小鼠腓骨骨折愈合的影响，为Ihh信号通路抑制剂治疗骨折患者提供实验和理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1动物 40只同时存在基因型Ⅱ型胶原(Col2)a1-哺乳动物细胞Cre重组酶表达质粒(Cre ERT2)的 Ihhf1/f1小鼠，12周龄，体质量(23.42±2.25)g，购于浙江中医药大学动物实验中心，生产许可证号SCXK(沪)2020-0015。所有小鼠均给予常规饲料喂养，自由进食、饮水，本研究动物实验符合复旦大学科学部实验动物伦理学标准。

1.1.2主要试剂与仪器 超净工作台(济南鑫贝西生物技术有限公司)、低速离心机(山东博科集……