杨丽仙 孙艳平* 肖桂萍 周显珍 王乔平 董昱廷

（1，云南省曲靖市动物疫病预防控制中心 655000；2，云南省曲靖市兽药饲料监察所 655000）

血凝与血凝抑制试验(HA-HI 试验) 具有经济、快速、可靠、操作简便的特点，可在短时间内处理大量样品报告禽类血样的抗体水平，是我国各地防疫监督机构和养殖场进行流行病学调查、疾病诊断及免疫效果监测的主要方法之一。实践中，HA-HI 试验的操作易受样品、试剂、器材、人员、环境等因素影响，使其敏感度、准确度降低，造成试验结果偏差，甚至误判，只有充分理解试验的各方面实质和要领，才能熟悉应用好本试验原理。

1 原理

细菌、红细胞等颗粒性抗原或表面覆盖、吸附抗原的颗粒性物质，与相应抗体（免疫血清、疫病恢复期血清）结合后，在电解质参与下，经过一定的时间，颗粒抗原被凝集形成肉眼可见的团块，这类试验统称为凝集试验，新城疫、禽流感许多病毒的包膜中含有按病毒密码合成的蛋白质，这种蛋白质（血凝素）有凝集某些动物红细胞的能力，称为红细胞凝集，简称血凝(HA) 试验。血凝试验能被相应的特异性抗体抑制，阻断病毒颗粒表面的抗原与红细胞凝集，先使抗体与病毒结合，血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上，红细胞将进行自然下落，沉降到V 形孔底部，这种红细胞凝集抑制试验简称血凝抑制(HI) 试验。

2 材料与方法

2.1 材料

微量移液器、96 孔微型血凝反应板、微量振荡器、加样槽、微量移液器枪、新城疫（禽流感）标准抗原、阳性血清、阴性血清与待检血清、1%鸡红细胞悬液、PBS 液。……