张虎平 马艳品

原发性肝癌(primary hepatic cancer,PHC)是世界范围内常见恶性肿瘤之一[1]，死亡率高，其在男性恶性肿瘤死亡率中居第2位，女性中居第6位[2]，早期诊断、早期发现并采取积极的预防干预措施，对于延长患者生存时间、降低死亡率具有重要的意义[3-4]。血清异常凝血酶原(DCP)在一定程度上反映了患者的肝脏损伤情况[5]，NK细胞和CD4+、CD8+水平则反映了患者的免疫功能，对于原发性肝癌患者的疾病进展具有一定的指示性作用[6]。本研究对血清DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平与PHC发生发展的关系进行研究，为临床治疗以及病情判断提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月至2020年4月诊断的125例原发性肝癌患者作为研究对象，其中男性患者60例，女性患者65例，年龄55～65岁，平均年龄为(59.25±2.36)岁，体重指数平均为(24.52±2.59)kg/cm2，根据TNM分期标准：Ⅰ～Ⅱ期患者69例，Ⅲ～Ⅳ期患者56例。另选取乙肝潜伏期患者、肝硬化患者以及表观健康者各125例作为对照。4组对象的性别、年龄、体重指数之间的差异不存在统计学意义(P>0.05)，见表1。所有入选研究对象均签署知情同意书，并经医院伦理委员会论证通过。

表1 4组患者的基线资料比较

原发性肝癌纳入标准：①符合原发性肝癌诊断标准[7]；②预计生存时间在6个月以上；③KPS评分均≥70分；④对本次研究使用药物无用药禁忌；⑤患者均采取手术联合化疗治疗。

肝硬化患者纳入标准：①均符合肝硬化标准[8]；②均为肝硬化稳定期，排除急性发作患者。

乙肝患者纳入标准：①均符合慢性乙型肝炎诊断标准[9]；②入组前2周未使用抗病毒或免疫抑制剂。

排除标准：①心、肝、肾功能严重不全者；②存在交流障碍的患者；③血常规异常患者；④不配合本研究方案患者。

1.2 研究方法

对所有研究对象入组后进行血样采集4 ml，运用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+水平以及NK细胞数量检测。同时对上述样本进行离心，取上清液，采取化学发光法检测DCP水平。

1.3 观察指标

1.3.1 4组研究对象的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平比较 分别比较原发性肝癌组患者、乙肝患者、肝硬化患者以及健康组的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平之间的差异。

1.3.2 PHC不同病理患者的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平比较 分别对不同TNM分期、肝内转移、组织分化、淋巴结转移患者的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平比较。

1.3.3 相关性分析 采用spearman相关性分析，比较PHC病理状态与患者的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平之间的相关性。

1.3.4 联合诊断效能比较 分别对DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平及其联合的诊断效能进行分析，同时采用ROC曲线分析其诊断效能。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 4组研究对象的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平比较

4组研究对象的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平之间的差异存在统计学意义(P<0.05)。通过两两比较，4组研究对象的DCP、CD8+表达水平从高到低依次为原发性肝癌组、肝硬化组、乙肝组、健康组，4组研究对象的NK细胞、CD4+表达水平从低到高依次为原发性肝癌组、肝硬化组、乙肝组、健康组(P<0.05)，见表2。

表2 4组研究对象的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平比较

2.2 PHC不同病理患者的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平比较

组织高分化以及TNM分期越高，患者的DCP、CD8+表达水平越高，NK细胞、CD4+水平越低；随着患者的淋巴结以及肝内转移，患者的DCP、CD8+表达水平越高，NK细胞、CD4+水平越低(P<0.05)，见表3。

表3 PHC不同病理患者的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平比较

2.3 相关性分析

通过相关性分析，原发性肝癌患者的组织分化、淋巴结转移、TNM分期、肝内转移情况与患者的DCP、CD8+表达水平呈现正相关，与患者的NK细胞、CD4+水平呈现负相关，见表4。

表4 相关性分析

2.4 联合诊断效能比较

通过对早期肝癌的联合诊断分析，DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平具有降耗的诊断效能，通过ROC曲线分析，早期肝癌的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平临界值分别为2049.11 mAU/ml，32.67%，24.19%，16.71%。详见表5。

表5 联合诊断效能比较

3 讨论

原发性肝癌的早期诊断、早期治疗对于延长患者生存时间、降低死亡率具有十分重要的意义，如果采取积极的预防干预措施，则可降低患癌的最大可能[10]。T淋巴细胞亚群不仅可以从细胞水平反映疾病病情，还可以帮助探讨疾病的发病机制，从而为临床疾病的诊断、治疗及预后判断提供有效的参考。NK细胞和CD4+、CD8+水平可能参与肿瘤免疫的调节，这类细胞具有免疫功能和免疫抑制特性，目前，肝癌患者的T淋巴细胞的数量与患者的疾病进展的相关性研究较少[11]。DCP已经被证实为原发性肝癌患者重要的肿瘤标志物，本研究通过相关性分析[12]，旨在提出疾病进展与患者的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平之间的相关性。

本研究中，4组研究对象的DCP、CD8+表达水平从高到低依次为原发性肝癌组、肝硬化组、乙肝组、健康组，4组研究对象的NK细胞、CD4+表达水平从低到高依次为原发性肝癌组、肝硬化组、乙肝组、健康组，且随着患者的病理状态的不断恶化，患者的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平显著发生异常变化，分析认为，在肝脏细胞发生癌变的过程中，癌细胞对于凝血酶原前体的合成具有一定的抑制性作用。在癌细胞的抑制性作用下，患者的凝血酶原前体的羧化程度的严重不足，从而导致患者产生大量DCP,在以往的报道中[13]，DCP联合甲胎蛋白，对于原发性肝癌的鉴别具有积极的意义，在原发性肝癌的诊断中，DCP可提高对于甲胎蛋白含量较小患者的检出率，对于临床诊断具有重要意义。王晴晴等[14]通过对患者的DCP研究显示，原发性肝癌患者的DCP水平显著升高，对于原发性肝癌患者的诊断以及疾病病情的分析具有积极的意义，与本研究一致。

以往的研究显示，在肿瘤患者的发病期间，其免疫状态处于显著的抑制状态，主要表现为患者的NK细胞和CD4+、CD8+水平的变化。CD4+具有显著的辅助以及诱导其前体细胞的功能，在对肿瘤的抵抗性作用中起到重要的意义，CD8+具有负性调节作用，可以辅助T细胞受体识别抗原并参与T细胞活化信号的转导，从而特异性地杀伤靶细胞。两者的平衡能力对于患者的免疫反应调控意义重大。NK细胞则主要体现了患者的机体自身的吞噬作用，本研究中，通过对患者的血清以上免疫指标的分析显示，随着患者的疾病的进展，患者的NK细胞和CD4+、CD8+水平的异常程度显著升高，提示在疾病的进展过程中，患者的免疫功能显著抑制。而张洪昌等[15]通过对原发性肝癌患者的以上免疫指标的分析中指出，随着患者的疾病进展，患者的免疫功能显著抑制，与本研究相互印证。另外，本研究的相关性显示，在疾病的进展过程中，患者的DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平与疾病的不同病理状态呈现显著相关，也在一定程度上印证了以上理论研究。

综上所述，血清DCP、NK细胞和CD4+、CD8+水平与PHC发生发展显著相关，可作为疾病进展以及治疗效果的重要依据。