汤 娟， 柯 洁， 付 裕， 何晓伟， 李先伟△

(1．皖南医学院药学院病理学教研室， 2．皖南医学院医学影像学院， 3．皖南医学院临床医学院， 安徽 芜湖 241002)

肺纤维化(pulmonary fibrosis, PF)是一种呼吸系统罕见疾病，其特征是肺结缔组织过度增生，导致肺间隔增厚、肺部瘢痕形成、进行性严重呼吸困难等[1]。上皮间质转分化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)是上皮细胞逐渐向间充质样细胞转化、丧失上皮细胞功能特性而获得间质细胞(如肌成纤维细胞)特性的过程，在PF的发病过程中起着重要作用[2,3]，但其具体发生机制目前还不是很清楚。

近来的研究发现，转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)介导的Notch-1信号通路与了肺泡上皮细胞EMT进程，在PF的发生发展中起着重要的作用[4]。我们前期的研究也证实了Notch-1参与了肺泡上皮细胞EMT的发生[5]。但Notch-1是如何影响肺泡上皮细胞EMT进程的，目前不是很清楚。Twist-1是一种进化上高度保守的碱性螺旋-环-螺旋转录因子超家族成员之一，具有调控胚胎发育、诱导细胞发生EMT等功能[6]。研究发现，在特发性肺纤维化病人肺组织中Twist-1的表达明显升高[7]，而进一步研究表明Twist-1介导的肺泡上皮细胞EMT参与了肺纤维化的发生与发展[8]。而最新研究发现Notch-1/Twist-1信号通路参与了直肠癌细胞的EMT进程[9]。基于以上研究背景，本研究以肺纤维化大鼠和Ⅱ型肺泡上皮细胞为研究对象，以Notch-1/Twist-1信号通路为突破口，探讨肺泡上皮细胞EMT的发生机制，进而为PF的发病机制提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 动物与细胞

SPF级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，体质量(180±20)g，购于南京青龙山动物养殖场(许可证号：SCXK(苏)2018-0012)。大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞购于北京鸿跃创新科技有限公司(货号：CP-R003)。……