李少丽，胡晓凤，王家福，康 斌，李建林，尹忠良

（杭州佑本动物疫苗有限公司，浙江杭州310018）

1 猪伪狂犬病概述

伪狂犬病最早于1813年发生于某牛群，病牛极度瘙痒，症状与狂犬病相似，因此称为“伪狂犬病”。20 世纪70年代后，养殖产业开始密集，再加上国际贸易引起动物及副产品运输量增加的影响，伪狂犬病由牛传染给猪[1]。伪狂犬病病原为PRV，属疱疹病毒科甲疱疹病毒亚科，其毒力由多个基因协同控制，主要有编码胸苷激酶（TK）、糖蛋白gE、gD、gI 和核苷酸还原酶（RR）等，其中TK 是PRV的主要毒力基因。TK基因的失活大大地降低病毒毒力而不影响病毒在组织培养中的增殖，该基因对病毒在中枢神经系统中的复制起主要作用，而且通过基因工程手段完全缺失TK基因的疫苗毒株在临床应用中不会出现毒力返强现象。gE糖蛋白为猪伪狂犬病病毒的非必需蛋白，决定其毒力，并促进其进入中枢神经系统。gE基因的缺失可降低病毒毒力及神经组织嗜性，从而进一步提高疫苗的安全性。gG 蛋白是一种趋化因子结合蛋白，通过结合趋化因子使其不能发挥功能，导致机体不易或难以识别入侵的病毒，缺失gG基因可以迅速继发细胞免疫，产生大量的α和β干扰素[1-2]。

PRV 宿主范围广、复制周期短、高度致病性。徐志文等[3]构建的SA215 重组病毒可在Vero、BHK21、IBRS、PK15、MDBK 和CEF 细胞上增殖并产生细胞病变。陈陆等[4]将SA215 接种Vero 细胞后8 h 细胞即变圆变亮，集聚成团，24 h 约有50%细胞形成空斑，40 h 时蚀斑面积可达90%。Wang 等[5]将构建的缺失gE 基因的HN1201 株接种PK15 细胞做蚀斑纯化，疫苗灭活前抗原含量达108.67TCID50/mL。……