李治培，韦科龙，卢 瑛，谢耀锋

(广西水牛研究所，广西 南宁 530001)

0 引言

叶酸是机体细胞生长和繁殖所必需的物质，反刍动物通过瘤胃微生物的合成获得叶酸，然而随着高产奶牛的营养需要，仅依靠瘤胃微生物合成已无法满足奶牛机体对叶酸的需求[1]。目前奶水牛中添加叶酸少见报道，本文通过研究在日粮中添加包被叶酸对奶水牛生殖激素和血清生化指标的影响，以期为奶水牛高效利用叶酸提供基础数据。

1 试验材料与试验设计

1.1 试验动物

选取年龄3～4岁、体重相近、体况良好的奶水牛48头，随机分为4组，对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在基础日粮的基础上每天分别添加35 mg、70 mg和105 mg经包被处理的叶酸。饲养试验在广西南宁市某规模水牛养殖场内进行。

1.2 试验设计

1)不同水平包被叶酸对血清中叶酸的影响。在发情前期，发情第21天，妊娠期第60天，随机选取每个组中的6只母水牛采集血样，研究叶酸水平对血清中叶酸的影响。

2)不同水平包被叶酸对奶水牛生殖激素的影响。试验期为21 d，同期发情处理后，随机选取每个组中的6头母水牛，在PG处理当天、发情周期第0天、1天、2天、6天、10天、14天、18天、19天、20天、21天采血，测定血清中FSH、LH、E2和P4的浓度。

3)不同水平包被叶酸对奶水牛血清生化指标的影响。试验期为120 d，在妊娠期第30天、60天、120天，随机选取每个组中的6头母水牛采集血样，检测血清的生化指标。

1.3 饲养试验管理

试验奶水牛单牛喂养，由专门的饲养员管理，叶酸混合于精料中饲喂，牛只自由运动，在运动场有水槽，牛只自由饮水。

2 结果

2.1 不同水平包被叶酸对奶水牛血清FA含量的影响

不同叶酸添加水平在不同时间点对奶水牛血清中FA的影响，在发情前期、发情中期，各个组母水牛血清中FA浓度差异不显著(P>0.05)。在妊娠期第60天，对照组母水牛血清中FA浓度显著低于其他组(P<0.05)。

2.2 不同水平包被叶酸对奶水牛生殖激素的影响

日粮中添加不同水平包被叶酸后，母水牛血清中FSH均无显著性变化，FSH在3.6～14 mIU/mL浮动。在PG处理当天、发情周期第0天、6天、14天、20天，母水牛血清中LH出现显著性差异(P<0.05)，发情周期第1天出现峰值，其中70 mg/d组最高浓度为15.02 mIU/mL。在发情第6天，母水牛血清中E2浓度出现第一个峰值，其中70 mg/d 最高，E2浓度为230.30 pg/mL，但各组之间差异不显著(P>0.05)，之后增长速度逐渐放慢，在第19天出现第二个峰值，其中70 mg/d 组最高，E2浓度为244.70 pg/mL。在发情周期第0天和第1天，母水牛血清中P4出现显著性差异(P<0.05)，其中对照组较叶酸添加组P4的浓度都要高，其中70 mg/d组浓度最低为0.6 ng/mL；发情周期第14天出现峰值，其中105 mg/d 最高，为12.90 ng/mL，然后逐渐降低。

2.3 不同水平包被叶酸对奶水牛血清生化指标的影响

日粮中添加不同水平包被叶酸对妊娠母牛不同妊娠阶段血清生化指标的影响：妊娠第30天时，母牛血清中70 mg/d 组TP显著高于对照组和105 mg/d 组(P<0.05)，其浓度为72.04 g/L；70 mg/d 组血清中AST含量显著低于其他组(P<0.05)，浓度为153.04 U/L。妊娠60 d时，70 mg/d组血清中GLOB、AST含量显著高于对照组(P<0.05)，其浓度分别为32.84 g/L、161.23 U/L；随着叶酸水平的增加，血液中GLU呈下降的趋势，但各组间差异不显著(P>0.05)。妊娠第120天时，70 mg/d组ALB显著高于105 mg/d 组(P<0.05)；而105 mg/d 组GLOB显著高于70 mg/d 组(P<0.05)。

3 讨论

3.1 不同水平包被叶酸对奶水牛血清FA含量的影响

从试验结果可知，在发情前期、发情中期，随着日粮中叶酸添加水平升高，母牛血清中FA浓度并没有显著升高，这说明在催情补饲期内，母牛瘤胃微生物合成的叶酸可以满足机体自身的需要量，在妊娠期对照组中FA较试验组要低，说明在这一阶段可以适量添加叶酸。

3.2 不同水平包被叶酸对奶水牛生殖激素的影响

在动物的发情周期中，LH分泌有明显的规律性，呈脉冲式分泌，在卵泡期，LH分泌量基本恒定，直到排卵前分泌量才明显增加，形成排卵前峰[2]。E2的分泌呈明显的周期性变化，而且在发情周期中其消长规律与P4相反，在发情周期的间情期和卵泡发育早期，血浆E2水平很低。试验研究结果表明，在发情周期第10天，空白对照组P4的浓度出现峰值，而叶酸添加组P4的浓度在第14天出现峰值，此时母牛血清中LH浓度差异显著(P <0.05)。在发情周期第20天，母牛血清中LH浓度出现峰值，添加叶酸组显著高于对照组(P<0.05)，说明日粮中添加叶酸可以提高LH的峰值。通常哺乳动物发情前后极低的P4水平利于其进入下一发情周期[3]，本实验中添加叶酸组母水牛P4水平在发情后48 h内均低于对照组，说明日粮中添加叶酸能促进母水牛发情。

3.3 不同水平包被叶酸对奶水牛血清生化指标的影响

血清中GLU、TP、ALB作为糖和蛋白质代谢指标的参考，TC和TG是脂肪代谢和肝功能指标。在氨基酸代谢和蛋白质、脂肪和糖转换过程中，转氨酶有极其重要的作用，特别是AST和ALT还是反应肝脏和心脏功能的指标。本试验中，在妊娠第30天时，70 mg/d 组TP含量显著提高，说明日粮中添加叶酸可以加快母牛妊娠早期蛋白质代谢。妊娠第60天时，随叶酸添加水平的增加，血液中GLU均低于对照组；70 mg/d 组中GLOB、AST含量显著高于对照组(P<0.05)，说明日粮中添加叶酸可以提高母牛妊娠早期蛋白质代谢，并促进了氨基酸代谢。妊娠第120天时，添加叶酸组ALB含量较对照组增高，且随着叶酸水平的添加，GLOB也随着增高，说明日粮中添加叶酸可以提高妊娠后期蛋白质代谢。

4 结论

奶水牛的营养及健康状况显著影响发情、泌乳、繁殖等性能，本实验借鉴了郑亚琳[4]的设计思路，大部分实验结果大致相同，证明叶酸能促进反刍动物的生产性能。本实验在日粮中添加叶酸可以提高LH的峰值，在奶水牛发情前后降低P4水平，促进其在下一发情周期的发情。日粮中添加叶酸可以提高不同妊娠阶段奶母水牛蛋白质代谢，促进氨基酸代谢，泌乳奶水牛日粮中包被叶酸的适宜添加量为70 mg/d。