姚春阳，曹雨欣，徐文豪，马先强

（1. 山东省滨州畜牧兽医研究院 256600；2. 滨州医学院药学院 264000；

3. 滨州市滨城区农业农村综合服务中心 256600；4. 惠民县农业农村服务中心 251700）

产气荚膜梭菌又称魏氏梭菌，是一种人兽共患的病原体，魏氏梭菌按照分泌毒素类型主要分为A、B、C、D、E五种类型[1，2]，A型菌引起人畜气性坏疽，还可以引起马匹的坏死性肠炎，B型产气荚膜梭菌可引起羊羔痢疾、肠毒血症，特别是一周内的羊羔极易感染，临床表现为腹泻、食欲不振等，且一经出现，致死快，救治困难，C型产气荚膜梭菌是奶牛、犊牛及羊肠毒血症、仔猪红痢和鸡的坏死性肠炎的主要病原菌，D型可引起羔羊、绵羊、山羊、牛及灰鼠肠毒血症。E型偶尔引起犊牛和羔羊肠毒血症[3-6]。魏氏梭菌为条件性致病菌，当天气、饲养条件骤变时往往导致牛、羊、鸡、家兔等动物发病，造成养殖户的重大损失[7，8]。

B型产气荚膜梭菌可产生α、β、ε3种致死性毒素，β毒素是该菌主要致病因子之一，具有细胞毒性，β毒素可特异性地结合在内皮细胞上，引起血管坏死、出血和继发的缺氧组织坏死，β毒素也能损害神经系统，从而使动物表现严重的精神沉郁[9]。β毒素基因可编码 336个氨基酸分子量大小约为35 ku，本研究将β毒素基因进行了克隆、测序及截短表达，研究如下。

1 材料与方法

1.1 主要材料及试剂

B魏氏梭菌 C58- 1、pET32a（+） 和Ecoli. BL21感受态细胞均为本实验室保存和制备。

LB培养基为青岛海博生物技术有限公司产品；pMD 18-T、限制性核酸内切酶快切酶 BamHⅠ和SalⅠ、Premix Taq、T4DNA连接酶为TaKaRa 试剂公司所售，细菌基因组提取试剂盒和胶回收试剂盒为Omega公司产品。……