杨 睿,袁林江*,王 刚,袁林杰,有小龙,牛晚霞,于丽萍

活性污泥中一氧化氮还原酶的提取和测定优化

杨 睿1,2,3,袁林江1,2,3*,王 刚1,2,3,袁林杰1,2,3,有小龙1,2,3,牛晚霞1,2,3,于丽萍1,2,3

(1.西安建筑科技大学环境与市政工程学院,西安 陕西 710055；2.陕西省环境工程重点实验室,西安 陕西 710055；3西北水资源与环境生态教育部重点实验室,西安 陕西 710055)

通过正交实验,研究了超声破碎法和低温高压破碎法提取一氧化氮还原酶(nitric oxide reductase,nor)的活性,分析了超声强度和次数,破碎压力和次数,裂解液的添加量等因素对于胞内可溶性蛋白和核酸(DNA)的释放与提取nor活性的影响.根据活性污泥中酶的催化特性以及其他实验条件,完善了nor催化活性的测定方法.结果表明超声法提取nor的参数应设定为,超声次数为100次,超声强度为500W,裂解液的添加量为0.1mL.低温高压破碎法提取nor的参数应设定为破碎次数为4次,破碎压力为50MPa,裂解液的添加量为0.1mL.低温高压破碎法下的胞内可溶性蛋白和DNA的释放量与nor的最大催化活性要高于超声破碎法.此外,在nor催化活性的测定方法中,nor活性测定终点时间应为15min.

氧化亚氮；污泥膨胀；一氧化氮还原酶；提取；测定

温室气体氧化亚氮排放问题[1-3]和污泥膨胀问题[4-5]是污水处理厂一直面临且急需解决的两个关键问题.解决问题的关键是判别问题的种类以及何种因素引起该问题.

污水处理厂中氧化亚氮产生途径有三种,分别为羟胺的不完全氧化、异养反硝化过程和硝化菌的反硝化过程.不同的运行……