史艳艳

（天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心 300402）

酶联免疫吸附技术（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是基于抗原抗体反应的一种新型、快速的免疫测定技术。由于ELISA 检测技术的灵敏度高、特异性强、选择性好、实用性强，且不需要大型仪器设备，对工作人员的专业技能要求不高，被广泛应用于分析化学、生物药学、临床医学和食品安全等领域的检测。ELISA 检测技术不仅可以对饲料和食品中的药物残留、有害微生物和生物毒素等物质进行定性和定量分析，还能应用于转基因食品的安全检查，为饲料及食品安全提供参考依据。

1 酶联免疫吸附技术概述

1.1 技术原理

ELISA 是基于抗原-抗体的特异性结合反应建立起来的一种快速检测技术，即首先通过固相状态的载体吸附已知的抗原或抗体，待测样本中对应的抗体或抗原与之结合形成特异性的抗原抗体复合物，通过洗涤的方法区分固相载体上的抗原抗体复合物和其他物质，再加入酶标记的抗原或抗体，也会出现抗原和抗体特异性结合反应结合在固相载体上，加入酶反应的底物后，底物由酶催化为带颜色的产物（颜色变化为定性检测），通过吸光度值计算待测样本的抗原（或抗体）量。由于产物的量与标本中受检物质的量直接相关，ELISA 还可以进行定量分析。

1.2 试验类型

ELISA 检测技术根据待检物质类型和检测条件主要分为间接法、竞争法和夹心法。间接法主要应用于抗体检测，即将已知抗原和固相载体结合，加入待检样本，其特异性抗体和固相抗原结合形成固相抗原抗体复合物，洗涤后固相载体上只留下特异性抗体，再加入酶标抗抗体与其结合，间接对抗体标记上酶，加入酶的底物进行显色即可。……