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利用绿色荧光蛋白报告基因筛选植物乳杆菌强启动子

2021-11-29萨初拉吴青海白苏乐其布日连海飞苏少锋付绍印

畜牧与饲料科学 2021年5期
关键词:植物

萨初拉,吴青海,,白苏乐,其布日,,高 娃,,连海飞,苏少锋,常 琰,付绍印,呼 和

(1.内蒙古自治区农牧业科学院,内蒙古 呼和浩特 010031;2.天津科技大学,天津 300457;3.巴彦淖尔市动物疫病预防控制中心,内蒙古 临河区 015000)

乳酸菌被公认为是安全的食品级微生物(GRAS)[1-2],植物乳杆菌在发酵饲料、青贮饲料、微生态制剂、医药及食品等领域广泛应用[3-5]。 使用基因工程手段修饰改造植物乳杆菌, 可释放更大的应用潜力。 植物乳杆菌具有高氧耐受能力和生长发酵稳定性, 作为宿主表达重组蛋白方面的应用越来越受到人们的重视[6-8]。 随着基因工程技术的迅猛发展,目前综合利用基因组学、转录组学及细胞工程手段[9-10]提高化合物、代谢产物及酶产量的研究已成为热点[11]。 Van Kranenburg 等[12]对来自植物乳杆菌隐蔽质粒pWCFS101、pWCFS102进行了分析,同时利用其复制子构建了克隆载体。在植物乳杆菌表达系统中, 研究比较成熟的是pSIP 系统。 Sørvig 等[13-14]在pSIP300 和pSIP400 系列基础上构建了通用表达载体。在此基础上,通过引入乳杆菌素A 及乳杆菌素P 基因的启动子进一步构建了pSIP500 系列载体。 pSIP 系统是以细菌素Sakacin A 为诱导物的诱导型表达系统,该表达系统避免了宿主细胞过表达而中毒及新陈代谢的干扰,但需要添加细菌素Sakacin A 诱导表达,因此,不适合应用于饲料及食品的发酵和肠道环境[15]。

国内植物乳杆菌作为外源基因表达宿主的研究起步较晚, 近些年来的研究主要集中在植物乳杆菌内含质粒研究及利用pSIP 系统表达异源蛋白上, 而自主研发植物乳杆菌表达载体方面报道较少。……

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