郑厚胜， 郑斯文， 王英平*， 白玉洁

(1.吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130118；2.中国农业科学院特产研究所，吉林 长春 130112)

环磷酰胺(cyclophosphamide，CTX)适用于抗肿瘤和部分免疫性疾病[1-2]。CTX是一种细胞毒性药物，它在体外没有活性，在体内它可以破坏DNA的结构，切断拷贝导致体内细胞死亡[3]。研究表明，长期使用CTX具有极大的副作用，如免疫抑制，骨髓抑制和白细胞减少[4-6]。因此，CTX经常用于构建免疫抑制的鼠模型。

药理学研究证明，人参皂苷Rg3具有调节免疫[7-9]、抗氧化[10]和神经保护作用等[11]。20(R)-Rg3可能通过减少脂质过氧化物、清除自由基和改善能量代谢来降低大鼠脑缺血性脑损伤[12]，还可以通过激活PI3K/Akt通路抑制氧化反应和炎症反应，减轻叔丁基过氧化氢引起的肝细胞坏死和凋亡[13]。Rg3可有效增强免疫功能低下小鼠的细胞免疫功能[14]，20(S)-Rg3可以直接驱动B细胞产生IgA[15]。20(R)-Rg3和20(S)-Rg3均能增强小鼠对OVA诱导的免疫反应，使细胞因子IL-12、IL-4、IL-10、IFN-γ、IgG2a和IgG3增加[16]。此外，Rg3还可以降低化学抗性诱导的PD-L1表达并恢复T细胞对癌细胞的细胞毒性。因此，Rg3被认为是靶向PD-L1的新药[8]。

1 材料

1.1 动物 雄性SPF级BALB/c小鼠，体质量(24±2)g，购自长春亿斯实验动物技术有限责任公司，实验动物生产许可证号SCXK(吉)-2017-0005。小鼠自由饮食饮水，在温度24.0 ℃、相对湿度60%下适应性饲养2周后进行实验。

1.2 细胞株 YAC-1细胞，购自中国科学院细胞库。

1.3 药物与试剂 人参皂苷Rg3(吉林大学，纯度为97%)。环磷酰胺(江苏盛迪医药有限公司)；刀豆蛋白(Concanavalin，ConA)、脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)、红细胞裂解液、Hank’s液、曲拉通TritonX-100、Enhanced Cell Counting Kit-8(CCK-8)(北京索莱宝生物科技有限公司)；无支原体胎牛血清(美国Gibco公司)；……