谢 君， 芦 波， 李建华， 桂明泰， 姚 磊， 周训杰， 符德玉*

(1.上海中医药大学，上海 201203；2.上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院，上海 200437)

早期再灌注治疗是治疗心肌梗死的有效策略，但再灌注过程可诱发心肌缺血再灌注损伤(Ischemia/Reperfusion injury，I/R)，它涉及复杂的病理生理过程，包括氧化应激、炎症反应、细胞凋亡等，最终导致心肌细胞死亡[1-2]。研究发现，心肌细胞凋亡和氧化应激是缺氧/复氧(Hypoxia/Reoxygenation，H/R)极为重要的病理基础，其过程与GPX1等蛋白的异常活化密切相关[3-4]。

丹参及其活性成分在临床上被广泛用于治疗心脑血管缺血性疾病，疗效显著，可通过抗氧化、减轻炎症反应、清除自由基等作用来减轻心肌H/R损伤[5-6]，但是否能通过GPX1通路调控氧化应激及细胞凋亡尚不明确。因此，本实验探讨丹参喷干粉对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制，以期为相关研究提供参考。

1 材料

1.1 细胞 H9c2心肌细胞、293T人肾上皮细胞(美国 ATCC细胞库)。

1.2 药物和试剂 丹参喷干粉(雷氏丹参片，上海雷允上药业有限公司，批号Z31020192)。CCK8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒、AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒、活性氧(ROS)检测试剂盒、羊抗兔HRP标记二抗、羊抗鼠HRP标记二抗(上海碧云天生物技术有限公司，货号C0037、C1062L、S0033、A0208、A0216)；胎牛血清(美国Gibco公司，批号16000-044)；DEME培养基(美国HyClone公司，批号SH30243.01)；N-乙酰半胱氨酸(NAC)(美国MCE公司，货号HY-B0215)；0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液(北京索莱宝科技有限公司，货号T1300-100)；丙二醛(MDA)检测盒、超氧化物歧化酶(SOD)检测盒(南京建成生物工程研究所，货号A003-1、A001-3)；GPX1抗体(北京博奥森生物技术有限公司，货号bs-3882R)；cleaved caspase3、cleaved PARP(英国Abcam公司，货号ab2302、ab32064)；……