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UPF1在肝癌中的表达及其对肝癌细胞增殖和侵袭迁移的影响

2021-11-23刘亚萍李雅睿和水祥

现代消化及介入诊疗 2021年9期
关键词:肝癌实验检测

刘亚萍,李雅睿,和水祥

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是消化系统常见恶性肿瘤之一,目前手术仍是其根治的主要手段,但因HCC转移能力强,往往发现时已进入晚期阶段,失去手术机会[1-2]。因此,针对转移途径研究,寻找HCC有效的治疗靶点成为目前研究的热点。

无义介导的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)通过选择性降解含有无义突变的mRNA,以避免异常蛋白产生和积累,是真核生物细胞中普遍存在的mRNA监管员[3-4],此过程中上游移码蛋白(up-frameshift,UPF)发挥主要作用,其中UPF1是NMD过程的关键因子[5-6]。对部分肿瘤研究发现,UPD1参与肿瘤细胞增殖及转移过程[7],而UPF1与HCC的关系目前尚不完全清楚。本研究从组织及细胞水平分别检测肝癌中UPF1表达情况,并分析UPF1表达与肝癌临床病理特征的关系,同时通过体外转染UPF1过表达质粒,检测其对肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,并初步探讨其可能的机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2017年1~6月就诊于西安交通大学第一附属医院并行手术治疗的HCC患者共40例,其中男31例,女9例,年龄32~75岁,平均年龄56岁,每例均收集癌组织与对应的癌旁组织,患者术前均签署知情同意书,并经过医院伦理委员会批准。患者术前均未接受放化疗和免疫治疗,随访资料完整且所有组织标本均经术后病理检查证实。手术标本在切除获得后迅速置于液氮罐或-80 ℃冰箱中保存。

1.2 细胞株及主要试剂

人永生化肝细胞LO2、人肝癌细胞株HepG2、Hep3B、SMCC7721、MHCC-97H、MHCC-97L(购于上海生命科学研究院,由西安交通大学第一附属医院实验中心保存),DMEM培养基(GIBCO公司,美国),胎牛血清FBS(杭州四季青生物工程材料有限公司,中国),胰蛋白酶、MTT、DMSO (Sigma公司,美国),Transwell小室(Millipore公司,美国);……

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