青蒿琥酯抑制肺腺癌A549细胞的增殖及相关机制的研究
2021-11-22马畅,吴桐,李妍*
马 畅,吴 桐,李 妍*
(吉林医药学院:a.免疫药理学重点研究室,b.2017级卫生检验与检疫本科班,吉林 吉林 132013)
肺癌是我国发病率及死亡率均占首位的恶性肿瘤,由于环境污染因素导致其发病逐年增加[1]。肺癌临床治疗可采用手术、放疗或化疗等,但耐药发生率高且癌细胞迁移侵袭力强,目前患者5年生存率仅为4%~15%。按组织分型,肺癌分为小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),两者分别占15%和85%。NSCLC又可分为肺腺癌(adenocarcinoma,ADC)、鳞癌和大细胞肺癌[2]。其中ADC占肺癌总发病率的80%,对其耐药机制研究以及筛选拮抗化疗耐药制剂对改善临床疗效至关重要。磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,即AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号转导通路整合营养、细胞因子和生长因子信号,与肿瘤发生发展关系密切[3]。对人肺癌组织和A549等肺腺癌细胞研究表明,该信号通路过度活化可参与癌细胞增殖、抵抗凋亡、迁移和侵袭[4]。来源于植物黄花蒿的青蒿素和其多种衍生物具有抗疟活性,其中青蒿琥酯(artesunate,ART)等对多种肿瘤具有抑制作用[5]。ART对肺癌增殖有何影响,是否可拮抗耐药、转移、侵袭相关信号,尚需实验研究加以探讨。本研究以体外培养的肺腺癌细胞A549为模型,研究ART对癌细胞增殖的抑制作用,并分析相关机制,阐述其在辅助肺癌治疗中的价值。
1 材料与方法
1.1 材 料
细胞培养液1640购自Gibco公司;ART购自上海源叶生物科技有限公司;MTT、DMSO购自美国Sigma公司;活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光探针(dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)、碘化丙啶(propidium iodide,PI)购自碧云天生物技术有限公司;鼠抗人TSP50、S6K1、MMP-2抗体购自美国Abcam公司;HRP标记二抗购自中杉金桥生物技术有限公司。……
