陈谭子芃 植广林 单 芬 黄润基

(广州动物园，广州市野生动物研究中心，广州，510070)

1 材料与方法

1.1 动物

受影响的四爪陆龟属于华南某动物救护站，该站共有22只成年四爪陆龟。它们的饮食包括饲养区域内自然植被与日常加入的水果和蔬菜，以保证85%的草本植物和蔬菜、10%的水果和5%的蛋白质饮食结构[6]。冬眠后(3—4月)，体重在1 150—1 630 g的4只成年个体(3♀，1♂)表现出厌食、虚弱和嗜睡的迹象。另外，在其后肢的远端关节和尾巴中观察到炎症和水肿。

1.2 样品

通过用23G针头和2 mL注射器穿刺后尾静脉获得4个患病个体的血液样本，将每个样本0.6 mL放入2个装有肝素锂作为抗凝剂的试管中(一次性使用真空肝素锂采血管，江苏康捷医疗器械有限公司)。一支试管用于确定血液学参数，另一支用于血液生化参数测定。后者在室温下放置30—40 min，然后3 000 r/min离心10 min，分离血浆，以避免溶血。将获得的血浆保存在-20℃直至分析。

1.3 血液学和血液生化检测

血液学参数包括红细胞计数(RBC)、红细胞体积(PCV)、血红蛋白质量浓度、白细胞计数(WBC)和白细胞差异计数。用微量血细胞比容离心机以3 000 r/min测定PCV；通过自动血液分析仪测定血红蛋白质量浓度。使用血细胞计数器和白细胞稀释液测定RBC和WBC[7]。在具有Diff-Quick样染色的血液涂片上对100个白细胞进行差异计数。对血浆样品进行生化分析，这些样品在宏观上没有显示溶血或血脂。分析指标包括总蛋白、尿素、尿酸、葡萄糖质量浓度和氯化物、钾、钠、钙、磷的离子浓度，以及血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。……