李 艳，张煜轩，楚品品，蒋智勇，席振军，蔡汝健，勾红潮，张昆丽，宋 帅，卞志标，李春玲

（广东省农业科学院动物卫生研究所，广东省畜禽疫病防治研究重点实验室，农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站，广州 510640）

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非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的家猪和野猪的一种急性、热性和高度致死性传染病，病死率可达100%[1]。2018年8月3日，非洲猪瘟疫情在中国沈阳市沈北新区首次被发现[2]，随后在全国各地陆续爆发，给中国养猪业带来了毁灭性的打击，造成了前所未有的经济损失[3]。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告疫病，中国将其列为一类动物疫病。目前非洲猪瘟尚无有效疫苗，现阶段该病的防控重点仍然是早发现、早剔除进而有效预防和控制疫情，因此建立ASFV快速、特异的检测方法对ASF防控具有重要意义。

ASFV是非洲猪瘟病毒科的唯一成员，是一种大型囊膜病毒，基因组由单分子线性、共价闭合的双链DNA组成，大小为170～190 kb，编码151～167个开放阅读框[4-5]。ASFV粒子结构复杂而规则，包含50多种结构蛋白，呈现二十面体对称结构，病毒粒子直径约为200 nm[6]。P72蛋白是ASFV的主要结构蛋白，由基因B646L编码，该基因高度保守，是目前ASFV检测中常用的引物设计靶标[7]。

PCR方法是目前ASFV快速诊断中广泛推荐使用的核酸检测技术[8]，贾云飞等[9]针对非洲猪瘟病毒p72基因建立了非洲猪瘟病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法，崔贝贝等[10]基于E184L基因建立了非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法。荧光定量PCR方法检测灵敏度高、特异性强，但所用仪器和试剂价格昂贵，成本高，且对操作人员要求严格，不利于其在条件一般的实验室或基层兽医临床检测中大规模推广应用；……