夏坤杰,向 燕,陈淑琴,邓 韵

(1.上海市中西医结合医院 儿科,上海,200082;2.上海市虹口区欧阳路街道社区卫生服务中心 全科门诊,上海,200081)

黄芪常用于治疗脑缺血损伤等中枢神经系统退行性疾病，黄芪甲苷Ⅳ (As Ⅳ)是从黄芪中提取的主要活性化合物之一，已被证实能通过血脑屏障并在脑实质中发挥作用[1]。As Ⅳ可通过抑制促炎细胞因子的产生和激活中枢神经系统通路发挥抗炎作用。此外，黄芪甲苷还可通过增强肥胖大鼠下丘脑瘦素敏感性来改善机体代谢紊乱[2]。本研究探讨黄芪甲苷改善炎症反应和瘦素抵抗性预防肥胖性高血压的作用机制，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物来源

雄性Wistar大鼠(35只,日龄21 d)购自斯贝福(北京)生物技术有限公司。所有动物均饲养在恒温室内(22±2)℃,光照周期为12 h光照、12 h黑暗，可自由取食和饮水。实验动物生产许可证号为SCXK (京)2019-006,实验动物使用许可证号为SYXK (京)2019-009。

1.2 试剂器材

As Ⅳ购自成都曼思特生物科技有限公司，试剂器材包块α7nAChR选择性拮抗剂α-BGT[(1 μg/(kg·d),Cat No.ab120542，Sigma)]、ALC-HTP系统(ALCBIO,China)、血糖仪(Freestyle,Abbott Diabetes Care,USA)、戊巴比妥(购自中国医药集团，生产批号F20081216);Au5400自动分析仪(奥林巴斯，日本)、血浆瘦素(Assay Biotech,Cat No.10638R)和胰岛素(Crystal Chem,Cat No.90010)、Elisa试剂盒(购于北京四正柏生物科技有限公司)、Trizol试剂(美国Invitrogen公司,Cat No.15596-028)、Prime Script RT试剂盒(Takara BioInc，Lot No.RR047A)、LightCycler 480 Ⅱ RT-PCR系统(Roche)、BCA蛋白测定试剂盒(Beyotime,China,Cat No.P0012S)、FluorChem Q 3.4(美国ProteinSimple)。同时还购入p-STAT3(Cat No.ab76315,Abcam,1∶150 000)、p-PI3K (Cat No.ab182651,Abcam,1∶500);α7nAchR (Cat No.ab10096,Abcam,1∶500);p-IKKβ (Cat No.ab59195，Abcam，1∶1 000);NF-KB p65 (Cat No.1075-1-ap，Proteomes，1:500);TNF-α (Cat No.ab6617,Abcam,1∶150);IL-6 (Cat No.sc-1265,Santa Cruz Biotechnology,1∶500)和β-actin (Cat No.ab6276,Abcam,1∶5 000)。

1.3 分组与干预方法

正常饲养1周适应当前环境后将大鼠分为正常脂肪饲料组(NC组,n=10)和高脂肪饲料组(n=25)。正常脂肪类食物中含有蛋白质(20.25%)、脂肪(7.25%)和碳水化合物(62%),高脂肪类食物中含有蛋白质(22%)、脂肪(27%)和碳水化合物(41%)。高脂肪饮食16周后，体质量比NC组高25%的则为肥胖大鼠。……