韦艳，张海英，欧冰凝，梁钢

（1.武警广西总队医院，广西南宁530000；2.广西医科大学，广西南宁530022）

表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gal⁃late，EGCG）是茶多酚的主要组成成分，其结构中含有多个邻位羟基而具有较强的抗氧化性，已有大量的实验研究证明EGCG不仅具有抗肿瘤活性，并且对肿瘤的多药耐药性有逆转作用。但由于EGCG结构不稳定，易发生氧化，生物利用度低，制约了其应用价值。本课题组通过乙酰化反应后进行结构修饰得到表没食子儿茶素没食子酸酯全乙酰化衍生物（Ac-EGCG），增加了其化学稳定性。前期研究发现Ac-EGCG体外有较好的抗肿瘤及逆转多药耐药性的作用［1-2］，本研究观察Ac-EGCG对人口腔鳞癌耐药细胞增殖的影响，并检测Ac-EGCG作用于人口腔鳞癌耐药细胞后对多药耐药1型基因（MDR1）、肺耐药蛋白（LRP）、谷胱甘肽转移酶（GST-π）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）各多药耐药相关基因表达的影响，探讨其逆转肿瘤多药耐药性的可能机制。

1 实验材料

1.1 细胞株人口腔鳞癌细胞KB及其耐药株KBV200保存于广西医科大学实验中心。人口腔鳞癌细胞KB及其耐药株KBV200置于37℃、5%CO2饱和湿度条件下，用含10%新生牛血清的RPMI 1640培养基培养，KBV200细胞培养时加入200 ng/ml长春新碱（VCR）维持其多药耐药性。

1.2 药品与试剂Ac-EGCG由本研究团队合成（纯度98.77%）；胰蛋白酶与牛血清购自美国Hyclone公司；Model-450酶联免疫检测仪（美国Bio-Rad公司）；实时定量PCR仪（ABI PRISM7900 system，美国Ap⁃plied Biosystems公司）。

2 方法

2.1 甲基四唑蓝（MTT）法检测Ac-EGCG对耐药细胞的抑制作用分别取对数生长期的人口腔鳞癌耐药细胞，稀释，调整单细胞悬液为1×105cell/ml，接种于同一96孔板中，每孔100µl，置37℃、5%CO2的培养箱中培养过夜。……