张晓丹

神经病理痛已经被认定为慢性疾病,其发生与神经元、神经胶质细胞等的作用影响有关,因此,在临床中很难被治愈。丹参的药理活性体现在改善脑缺血再灌注损伤、血小板功能、血液流变学等方面,有镇痛效果的可能性［1］。本研究分析丹参注射液对CII 大鼠P2X3 受体表达的影响,报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选取由某医学院实验动物中心提供的SD 大鼠18 只,均已成年,雄性,将其在室温下进行饲养,不限制饮食。取250 g±25 g SD 雄性大鼠随机分为对照组、CCI 模型组、CCI+丹参注射液组,每组6 只。

1.2 研究方法 ①建立CCI 大鼠动物模型：随机将大鼠分为对照组进行假手术,CCI 模型组与SF+CCI 模型组均建立疼痛模型,SF+CCI 模型组单独进行丹参注射液治疗。②动物行为学方法：观察丹参注射液对CCI 大鼠痛觉行为的影响(测定痛阈)：测定各组动物机械剌激及热剌激痛觉过敏现象。③免疫组织化学反应：先用兔抗P2X3(1∶500,CHEMICON International,Inc.)及生物素标记羊抗兔IgG 二抗血清(P2X3 和p38,1∶200,Vector,Burlingame)分别进行抗生物素-生物素-辣根过氧化酶(ABC)免疫组化法反应,DAB 呈色。然后进行免疫细胞化学P2X3 和p38 双重标记染色观察。采用Image-Pro Plus 图像分析系统对免疫组化反应结果的反应密度进行观察并予以分析。对所有组别大鼠背根神经节免疫组化反应结果进行对比分析。④原位核酸分子杂交试验：用地高辛标记的P2X3 和p38 寡核苷酸探针对各组大鼠背根神经节标本进行原位杂交。⑤逆转录(RT)-PCR 检测：分别提取各组大鼠背根神经节标本总RNA 进行RT-PCR 检测,PCR 产物经琼脂糖凝胶电［2］。⑥Western blot 分析：分别……