马慧娟，高 宏，牛鹏飞，梅 婵

(江苏省理化测试中心，江苏南京 210042)

应用PCR方法检测食品中动物源性成分的研究和标准有很多，目前已颁布的国家标准、行业标准和地方标准主要是基于常规定性PCR法和实时荧光PCR法对单一动物源性成分的定性检测。在实际工作中，对于动物源性成分不明确的加工制品，在需明确其成分时，需要通过不同的方法进行多次检测才能确定结果，其周期长、工作量大、成本高。在未来的动物源成分检测中，基于常规定性PCR法的检测技术已经越来越不能满足多种动物源性制品的鉴定需求，因此建立多重PCR法提高检测的效率与通量对肉类食品安全的及时监管十分重要[1]。本研究通过对新建立的一种检测动物源性食品中猪、牛、羊、鸡和鸭成分的多重PCR法进行混合肉样检测，验证其方法的适用性和可行性，并用建立的多重PCR检测方法和单一PCR检测方法对市售的20种动物源性食品分别进行检测，验证多重PCR法鉴别猪、牛、羊、鸡和鸭成分可行性。

1 材料与方法

1.1 材料及试剂

鲜肉（猪、牛、羊、鸭、鸡）购自南京某大型菜市场，-20 ℃保存。加工肉制品（鸭血、牛肉卷、鸡肉火腿肠、午餐肉罐头等）购自南京某菜市场、超市或火锅食材店。

DNA提取试剂盒TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver 5.0、10×PCR Buffer（Mg2+plus）、dNTP Mixture（各2.5 mmol·L-1）、TaKaRa Taq（5 U/µL）、琼脂糖（50 g），均购于宝生物工程（大连）有限公司。

1.2 仪器和设备

ABI 2720普通PCR仪，购自美国赛默飞；EPS 300电泳仪，购自Tanon；Universal GenoSens1800凝胶成像仪，购自上海勤翔。

1.3 实验方法

1.3.1 样本DNA提取及质量检测

样本DNA的提取方法按照DNA提取试剂盒的说明书方法步骤进行。……